Микроскопия мазка крови что это такое
Анализы с микроскопией: что они выявляют?
Исследования с микроскопией широко применяются в лабораторной диагностике. Для чего они назначаются и какой подготовки требуют? Об анализах с микроскопией нам рассказала врач сети лабораторий «KDL» (партнёр «Клиники Эксперт» Пермь), руководитель медицинского отдела медицинского центра «Диапазон» Мария Васильевна Бисерова.
— Мария Васильевна, какие анализы проводятся с микроскопией?
— Посмотреть под микроскопом можно любой биологический материал: мазки со слизистых, соскобы с кожи, урогенитальные мазки. Также можно исследовать мокроту, плевральную, синовиальную жидкость, эякулят, мочу, кал, ногти, волосы. Исследования позволяют выявить признаки воспаления, определить морфотип инфекционного агента (палочковая, кокковая флора, элементы грибка, простейших). Цитологические и гистологические исследования тоже можно отнести к микроскопии. Чаще всего они используются при исследовании операционного материала или материала диагностической биопсии.
Все микроскопические тесты удобные, быстрые, но при этом субъективные, требующие профессионализма специалиста лабораторной диагностики.
Читайте материалы по теме:
— Что показывает общий анализ крови (ОАК) с микроскопией?
— ОАК позволяет выявить наличие воспаления в организме, оценить количество эритроцитов и тромбоцитов. Микроскопия традиционно используется для оценки лейкоцитарной формулы. По изменению состава этой формулы можно предположить наличие вирусного или бактериального процесса в организме.
Читайте материалы по теме:
— Выполняется ли микроскопия в общем анализе мочи (ОАМ)?
— Безусловно, микроскопия в ОАМ выполняется, и необходима для выявления воспалительного заболевания мочевыводящих путей. В современной лаборатории микроскопическое исследование мочи заменено автоматическим методом проточной цитометрии, который с большой точностью позволяет оценить клеточный состав мочи, так как прибор идентифицирует и подсчитывает до 65 000 элементов мочевого осадка. В некоторых случаях (при выявлении патологии) врачу всё же приходится самому дополнительно исследовать мочевой осадок под микроскопом.
— Как подготовиться к общему анализу мочи?
— Для исследования средняя порция утренней мочи собирается в стерильный одноразовый пластиковый контейнер. Обязательно предварительное проведение гигиенических процедур.
— Кому и для чего назначают анализы мазков из зева и со слизистой носа?
— По результату риноцитограммы (микроскопии мазков из носа) мы можем предположить инфекционную или аллергическую природу воспалительного процесса. При инфекционных заболеваниях носоглотки чаще используются методы прямого выявления возбудителя – это посевы на флору и исследования методом ПЦР.
Подробнее о ПЦР читайте в нашей статье
— Какие ещё микроскопические исследования проводят при заболеваниях органов дыхания?
— Если заболевание сопровождается кашлем, важен общий анализ мокроты. При микроскопии можно выявить наличие клеток и микроорганизмов, которые в норме не должны присутствовать в мокроте (лейкоциты, макрофаги, атипичные клетки, спирали Куршмана, кристаллы Шарко-Лейдена и др.). Это также позволяет оценить степень и предположить причину воспаления (вирусное, бактериальное, аллергическое).
Для подтверждения инфекционного агента точными тестами являются бактериологические и молекулярно-генетические (ПЦР).
— Как подготовиться к такому анализу?
— Мокрота собирается в стерильный контейнер путём откашливания утром, до приёма пищи, после чистки зубов и тщательного полоскания полости рта кипячёной водой. При этом слюна из полости рта не должна попасть в контейнер.
— Вы упомянули о микроскопическом анализе синовиальной жидкости. Как и для чего его проводят?
— Общий анализ синовиальной жидкости позволяет выявить природу заболевания (воспалительную, невоспалительную). При этом оцениваются как внешние свойства (цвет, вязкость), так и химический состав. Но получить синовиальную жидкость можно только при пункции сустава, эту процедуру проводит врач. В современной диагностике при заболеваниях суставов широко используется определение маркеров воспалительных, в частности, ревматических заболеваний в крови. Это быстрый и надёжный способ правильно поставить диагноз и назначить лечение.
Хотите узнать больше об анализах? Читайте статьи в нашей рубрике
Записаться и сдать лабораторные анализы можно здесь
ВНИМАНИЕ: услуга доступна не во всех городах
Беседовала Дарья Ушкова
Редакция рекомендует:
Для справки:
Бисерова Мария Васильевна
Врач клинической лабораторной диагностики, руководитель медицинского отдела ООО «Медицинской центр «Диапазон»», сеть лабораторий KDL.
Микроскопия мазка крови что это такое
Микроскопия мазка крови – исследование под микроскопом препарата, приготовленного из капли крови.
Выполнение микроскопии мазка крови является опциональной частью общего анализа крови или лейкоцитарной формулы и отдельно не производится.
Микроскопическое исследование мазка крови, мазок крови, микроскопия крови, ручной подсчет лейкоцитарной формулы, мазок периферической крови.
Синонимы английские
Blood Smear, Peripheral smear, Manual differential, Red blood cell morphology, White Blood cell morphology, Peripheral blood smear, Blood Film Examination, Blood Film
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную или капиллярную кровь.
Общая информация об исследовании
Исследование позволяет морфологически оценить клетки (форменные элементы) крови, а также выполнить их подсчет. Клетки крови образуются и созревают в красном костном мозге и затем выбрасываются в общий кровоток. У каждой разновидности клеток свои функции. В физиологических условиях количество и морфологические признаки клеток крови стабильны и не выходят за рамки референсных значений. При различных заболеваниях количество и свойства (форма, объем, цвет, наличие включений, их количество и пр.) закономерно изменяется. По этой причине оценка клеточных элементов в мазке крови является универсальным тестом при диагностике многих патологических состояний и широко применяется в практике врача практически любой специализации.
Мазок периферической крови – это «моментальный снимок» клеток крови в том виде, в каком они находятся в момент взятия образца. Для выполнения исследования венозную или капиллярную кровь помещают на предметное стекло, которое должно быть тщательно обезжирено. Затем другое стекло ставят на предметное стекло под углом 45′ и проводят вдоль капли крови так, чтобы она растеклась тонким слоем по ширине шлифованного стекла. Затем мазок фиксируют, чтобы форменные элементы крови были более устойчивы. После этого мазок окрашивают специальным красителем, который делает клетки и их элементы более яркими, и высушивают. После чего врач в лаборатории изучает мазок под микроскопом.
Для чего используется исследование?
Пока не появились автоматические анализаторы, каждый раз, когда выполнялся общий анализ крови, проводилось микроскопическое исследование мазка крови, так как определить процентное соотношение различных форм лейкоцитов (лейкоцитарную формулу) по-другому было нельзя. В современных анализаторах подсчет лейкоцитарной формулы осуществляется автоматически. Однако при подозрении на наличие патологических форменных элементов крови микроскопия мазка крови опытным врачом по-прежнему является лучшим способом выявления и оценки атипичных и незрелых клеток.
Когда назначается исследование?
Существует достаточно широкий круг заболеваний и расстройств, при которых могут изменяться свойства клеток, циркулирующих в кровяном русле. В норме в кровь из костного мозга попадают только зрелые клетки, однако при ряде заболеваний, например при лейкозах, в кровь могут попадать незрелые клетки – бласты. При некоторых состояниях, например при массивной инфекции, в лейкоцитах могут появляться характерные примеси, сами клетки могут становиться атипичными, как при инфекционном мононуклеозе. Обнаружение в мазке патологических клеток в большом количестве позволяет заподозрить вызвавшее их заболевание и назначить дополнительное обследование.
Мазок крови может регулярно назначаться пациентам с онкологическими заболеваниями костного мозга, лимфоузлов для наблюдения за динамикой состояния и контроля за эффективностью лечения.
Микроскопия мазка крови что это такое
Клинический анализ крови – лабораторное исследование с оценкой количественных и качественных характеристик всех классов форменных элементов крови, включающее цитологическое исследование мазка периферической крови для подсчета процентного содержания разновидностей лейкоцитов и определение скорости оседания эритроцитов.
Общий анализ крови (ОАК), гемограмма, КАК, развернутый анализ крови.
Complete Blood Count (CBC), Hemogram, CBC with White Blood Cell Differential Count, Peripheral Blood Smear, Blood Film Examination.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозная кровь, капиллярная кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
Клинический анализ крови выполняется для диагностики количественных и качественных изменений форменных элементов – клеток крови: эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов. Их изменения могут быть обусловлены нарушениями процесса кроветворения, но чаще всего носят реактивный характер – отражают реакцию кроветворения на другие патологические состояния и заболевания. Поэтому клинический анализ крови является одним из наиболее распространенных рутинных исследований и используется врачами различных специальностей, ему отводится ведущая роль в первичном диагностическом поиске.
Для исследования может использоваться как венозная, так и капиллярная кровь, при этом использование венозной крови предпочтительнее. Взятие производится при помощи вакуумной системы, чаще всего из вен на локтевом сгибе. В специальной пробирке – вакутейнере уже содержится антикоагулянт (ЭДТА), который препятствует свертыванию крови. Объем набранной в вакутейнер крови должен соответствовать отметке на нём – так достигается необходимая концентрация антикоагулянта, что препятствует формированию микросгустков и, как следствие, неправильному подсчету количества клеточных элементов и искажению их морфологической структуры.
В настоящее время клинический анализ крови чаще всего выполняется на гематологическом анализаторе – высокотехнологичном приборе, способном определять и автоматически рассчитывать более 30 характеристик крови, в том числе осуществлять подсчет форменных элементов, включая основные популяции лейкоцитов. Принцип работы гематологических анализаторов основан на прохождении суспензии клеток через чувствительный элемент – лазерный луч или электрический ток. Каждая клетка преломляет лазер или меняет сопротивление электрического тока, эти изменения пропорциональны размеру клетки, на чем и основано их различение анализатором.
При наличии отклонений по результатам исследования на гематологическом анализаторе врач лабораторной диагностики производит морфологическое изучение мазка крови. В данное исследование микроскопия мазка включена изначально. Для визуального подсчета форменных элементов одну-две капли крови капают на предметное стекло, другим стеклом одним движением размазывают её тонким слоем и фиксируют специальными веществами. Затем мазки окрашиваются красителями для удобства различения и визуализации клеток и изучаются врачом под микроскопом. Традиционно подсчет проводят на сто клеток и полученные цифры записывают в процентах. Зная общее количество лейкоцитов, проценты можно пересчитать в абсолютные значения, которые гораздо более объективно отражают состояние лейкоцитарной популяции.
Параметры, определяемые в исследовании
Эритроциты – наиболее многочисленные клетки крови, их основной функцией является транспорт кислорода, который они выполняют с помощью содержащегося в них специального белка – гемоглобина. Гематологический анализатор определяет количество эритроцитов, содержание гемоглобина, гематокрит и рассчитывает на основании этого ряд характеристик – так называемых эритроцитарных индексов.
Эритроциты (RBC, Red Blood Cell) – безъядерные клетки, образуются в костном мозге из ретикулоцитов, имеют форму двояковогнутого диска, что позволяет достичь максимально возможную площадь поверхности для связывания кислорода. Эритроциты имеют диаметр 7-10 микрометров, они эластичны, легко могут менять форму для безопасного прохождения по мельчайшим сосудам – капиллярам. В мазке крови выглядят как бледно-красные круглые элементы с просветлением в центре. Единица измерения – 10 12 в литре (триллионов клеток в литре).
Гемоглобин (HGB) – белок, основной компонент эритроцита, обладает сродством к кислороду, благодаря чему обеспечивается транспортная функция эритроцитов. Насыщенный кислородом гемоглобин придает эритроцитам и крови в целом красный цвет.
Гематокрит (HCT) – характеризует соотношение объема эритроцитов и плазмы. Это расчетный параметр – гематологический анализатор рассчитывает объем эритроцитов из их количества и среднего объема одной клетки (MCV).
Средний объем эритроцита (MCV, Mean Corpuscular Volume) – рассчитывается анализатором путем деления суммы клеточных объемов на количество эритроцитов. Может иметь нормальное значение при наличии в крови одновременно микроцитоза и макроцитоза. В таких ситуациях следует обращать внимание на параметр RDW. Единица измерения – фемтолитр.
Среднее содержание гемоглобина в эритроците (MCH, Mean Corpuscular Hemoglobin) – отражает степень насыщения эритроцита гемоглобином. Рассчитывается путем деления концентрации гемоглобина на количество эритроцитов.
Средняя концентрация гемоглобина в эритроците (MCHC, Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration) также характеризует насыщение эритроцита гемоглобином. Рассчитывается путем деления гемоглобина на гематокрит.
Распределение эритроцитов по объему (RDW, Red Cell Distribution Width) – характеризует степень вариабельности объема эритроцитов – анизоцитоз. При наличии в крови популяции эритроцитов с измененным, но достаточно однородным размером значения RDW могут оставаться в норме. При выраженных различиях в объеме эритроцитов, когда MCV, характеризующий средний объем всех клеток нормален, RDW будет повышен.
Тромбоциты (PLT, Platelet) – форменные элементы крови, участвующие в остановке кровотечений путем формирования тромбов. Не являются клетками, представляют собой осколки цитоплазмы мегакариоцитов костного мозга. Диаметр 2-4 мкм.
Средний объем тромбоцитов (MPV, Mean Platelet Volume) – объем тромбоцитов уменьшается по мере старения клеток, поэтому увеличение данного параметра свидетельствует о преобладании в популяции молодых тромбоцитов.
Распределение тромбоцитов по объему (PDW, Platelet Distribution Width) – характеризует вариабельность размеров тромбоцитов.
Лейкоциты (WBC, White Blood Cell) – гетерогенная популяция ядросодержащих клеток крови, основной функцией которых является защита организма от чужеродных агентов. К лейкоцитам относятся клетки гранулоцитарного (эозинофилы, базофилы, нейтрофилы), моноцитарного и лимфоидного (Т- и В-лимфоциты) рядов. Современные анализаторы могут дифференцировать основные пять типов лейкоцитов, однако микроскопия мазка по-прежнему остается наиболее точным методом оценки лейкоцитарной популяции, так как позволяет не только определить количество разных лейкоцитов, но и выявить изменения в их морфологии, а также обнаружить атипичные клетки.
Процентное соотношение разных видов лейкоцитов в мазке крови называется лейкоцитарной формулой. Окраска мазков крови позволяет дифференцировать 5 типов лейкоцитов за счет разного окрашивания ядер и внутриклеточного пространства (цитоплазмы):
Вышеперечисленные типы лейкоцитов встречаются в мазке периферической крови в норме. При некоторых заболеваниях в кровь из костного мозга могут выходить клетки, которых в норме в мазке быть не должно: например, бласты – морфологический субстрат острого лейкоза. В заключении к исследованию обязательно указываются количество и по возможности морфологические особенности атипичных клеток.
Помимо подсчета лейкоцитов, при микроскопии оцениваются морфологические характеристики эритроцитов – их размер, форма. Эти параметры важны в диагностике различных приобретенных и врождённых анемий.
Скорость оседания эритроцитов. Тест основан на способности эритроцитов оседать под действием силы тяжести в крови, лишенной возможности свертываемости. В норме эритроциты оседают медленно, ускорение этого процесса происходит при агглютинации – слипании эритроцитов друг с другом, что приводит к увеличению массы оседающих частиц. Обычные эритроциты имеют на мембране отрицательный заряд, способствующий их отталкиванию друг от друга. При инфекционно-воспалительных, аутоиммунных и некоторых опухолевых (особенно парапротеинемических гемобластозах) заболеваниях происходит изменение белкового состава плазмы в сторону повышения содержания белков (например, иммуноглобулинов). Все белковые молекулы снижают мембранный заряд эритроцитов, способствуя их склеиванию между собой и увеличению скорости оседания. Тест проводится в течение часа, высоту полученного осадка измеряют в миллиметрах.
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Микроскопия мазка крови что это такое
Лейкоцитарная формула (с обязательной микроскопией мазка крови) – подсчет количества общего количества и разных видов лейкоцитов, а также изучение их морфологических особенностей посредством микроскопии мазка периферической крови.
Leukocyte Differential Count, WBC Count Differential, Diff, Blood Differential, Differential Blood Count, White Blood Cell Differential.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную, капиллярную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
Общая информация об исследовании
Окраска мазка крови специальными красителями позволяет различать клетки и внутриклеточные структуры, кроме того, разные виды лейкоцитов неодинаково восприимчивы к некоторым красителям и окрашиваются по-разному, что вместе с различиями в их морфологических свойствах (форма ядра, размеры и наличие внутриклеточных гранул) позволяет дифференцировать основные виды лейкоцитов при изучении мазка с помощью микроскопа. Традиционно подсчет проводят на сто клеток и полученные цифры записывают в процентах. Зная общее количество лейкоцитов, проценты можно пересчитать в абсолютные значения, которые гораздо более объективно отражают состояние лейкоцитарной популяции.
Гранулоциты называются так потому, что содержат в своей цитоплазме гранулы, в которых содержатся биологически активные вещества, необходимые для выполнения лейкоцитами своих защитных функций. Выделяют три типа гранулоцитов:
Вышеперечисленные типы лейкоцитов встречаются в мазке периферической крови в норме. При некоторых заболевания в кровь из костного мозга могут выходить клетки, которых в норме в мазке быть не должно: например, бласты – морфологический субстрат острого лейкоза. В заключении к исследованию обязательно указывается количество и по возможности морфологические особенности атипичных клеток.
Помимо подсчета количества клеток, врач лабораторной диагностики при микроскопии мазка крови отмечает изменения морфологии лейкоцитов:
Для чего используется исследование?
Когда назначается исследование?
Клинический анализ крови. Общая информация
Клинический анализ крови означает подсчет количества клеток в образце венозной крови. Капиллярная кровь не является рекомендуемой средой исследования для подсчета клеток, однако исследование гемограммы часто выполняют из образца капиллярной крови в отделениях интенсивной терапии.
Определение лейкоцитарной формулы, исследование среднего размера эритроцитов, тромбоцитов, определение количества предшественников эритроцитов (ретикулоцитов) и степени их зрелости, оценка скорости оседания эритроцитов и т.д., все это входит в понятие «клинический анализ крови».
Клинический анализ крови выполняется как первое скрининговое исследование при обращении и жалобах пациента на недомогание. Может быть выполнен сокращенный клинический анализ крови, так называемая «тройка» – подсчет количества эритроцитов, лейкоцитов и определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ). Сокращенный клинический анализ крови малоинформативен, т.к. может охарактеризовать только выраженные патологические процессы.
Более целесообразно из того же объема образца крови выполнить развернутую гемограмму: подсчет количества эритроцитов с оценкой их среднего размера (MCV), подсчет общего количества лейкоцитов и оценку лейкоцитарной формулы (подсчет нейтрофилов, базофилов, эозинофилов, моноцитов, лимфоцитов), подсчет количества тромбоцитов и оценку среднего размера тромбоцита (MPV), ретикулоцитов и их среднего размера (MRV), степени зрелости ретикулоцитов (IRF).
Многочисленные характеристики клеток в настоящее время могут быть получены в автоматическом режиме в течение 3-5 минут после взятия крови. На основании развернутого исследования гемограммы может быть сделано не только заключение о наличии воспалительной реакции, анемии, но и характере других патологических процессов, возможной перенесенной или продолжающейся кровопотере, дефиците не только железа, но и витамина В12, фолиевой кислоты.
Показания к исследованию
Метод исследования
Метод исследования зависит от требуемых параметров гемограммы.
В ручном режиме, из образца крови (3–5 мл) часть отбирается в капилляр для определения СОЭ, часть образца крови используется для определения гемоглобина, капля крови – для приготовления мазка и дальнейшего подсчета лейкоцитарной формулы. Отдельное количество крови требуется для приготовления мазка и подсчета тромбоцитов, а также часть образца крови необходима для исследования количества эритроцитов и отдельно – ретикулоцитов. В ручном режиме, при необходимости окраски и визуальной оценки мазка, результат развернутой гемограммы пациента в многокоечном стационаре, может быть получен в конце рабочего дня или позднее.
В условиях автоматизированного подсчета клеток и оценки различных популяций требуется от 150 до 300 мкл крови и 100 мкл для определения СОЭ. Исследование в автоматическом режиме основано на импедансном методе Культера (1956), в основе которого лежит принцип замыкания электрической цепи каждой клеткой, последовательно проходящей через апертуру пробоотборника. В последующем метод автоматизированного подсчета получил ряд усовершенствований, в современных анализаторах каждая клетка оценивается по нескольким параметрам: проводимости, светорассеиванию, размеру, наличию на поверхности CD-маркеров, соответственно, принадлежности к различным популяциям. Количество параметров определяется моделью прибора.
Исследование в автоматическом режиме позволяет выявить патологические образцы, которые должны быть пересмотрены визуально специалистом лабораторной диагностики. Визуальный контроль гемограммы предполагает приготовления мазка крови, слайда, что может быть выполнено из капли крови уже взятого образца как в ручном, так и автоматическом режиме. Автоматизированное приготовление мазка крови предпочтительно, т.к. происходит равномерное распределение капли крови и стандартизированное окрашивание. Визуальная микроскопия мазка проводится в пяти полях зрения.
Исследование крови в автоматическом режиме занимает 3–5 минут, если не требуется дополнительное приготовление мазка и исследование СОЭ.
Условия взятия и хранения образца
Клинический анализ крови выполняется из венозной крови, стабилизированной калиевой солью ЭДТА, если не указано иначе в инструкции к анализатору. Взятие крови выполняется натощак. Образец крови должен быть немедленно после взятия перемешан 9 раз осторожным переворачиванием, следует избегать образования пены и резкого встряхивания. До исследования образец крови может храниться при комнатной температуре (23–24 °С) в течение 24 часов в штативе, в вертикальном положении, в удаленном от света месте.
При использовании образца капиллярной крови для клинического анализа необходимо получить свободнотекущие капли капиллярной крови из предварительно прогретой области прокола. Сбор капиллярной крови без сдавливания пальца обеспечивает сохранность клеток. Надавливание области прокола и сбор образца из охлажденной конечности приведут к искажению результатов гемограммы. Образцы капиллярной крови должны быть стабилизированы калиевой солью ЭДТА, поэтому для взятия образца следует использовать капилляры, обработанные K3ЭДТА. Образцы могут храниться при комнатной температуре (23–24 °С) в течение 24 ч в штативе, в вертикальном положении, в удаленном от света месте.