На чем основан принцип применения индикатора андреде
Индикатор Андраде
Индикатор Андраде
Андраде индикатор — предназначен для выявления способности микроорганизмов понижать значение рН питательной среды при ферментативной деятельности.
Принцип
Приготовление
В 100 мл дистиллированной воды растворяют 500 мг фуксина кислого и добавляют 16 мл 1N раствора гидроксида натрия. Полученный раствор индикатора Андраде помещают в термостат (37 °С) на 20 ч, затем фильтруют 48 ч на свету. Стерилизуют в автоклаве при 0.5 атмосферы в течение 5 мин. Сохраняют во флаконах темного стекла с притертой пробкой. Приготовленной таким образом индикатор имеет соломенно-желтый цвет.
Реактив, имеющий розовую окраску, использованию не подлежит!
Смотреть что такое «Индикатор Андраде» в других словарях:
Индикатор Андраде — часто используемый в бактериол. работе индикатор рН среды, особенно при определении ферментации углеводов бактериями. Для приготовления И. А. в 100 мл дистил. воды растворяют 0,5 г кислого фуксина, прибавляют 15 мл 4% р ра натрия гидроксида,… … Словарь микробиологии
Андраде индикатор — (Е. P. Andrade, 1872 1906, амер. бактериолог) фуксин содержащий реактив, добавляемый в дифференциально диагностические питательные среды с углеводами для определения гликолитической активности бактерий; при сдвиге pH в кислую сторону питательная… … Большой медицинский словарь
АНДРАДЕ ИНДИКАТОР — Андраде индикатор, реактив, содержащий фуксин; применяется для определения ферментативной активности бактерий при их культивировании на средах с углеводами. При ферментации углеводов и сдвиге pH в кислую сторону среда приобретает красный оттенок… … Ветеринарный энциклопедический словарь
Рапопорт-Вайнтрауба среда — (М. А. Рапопорт; А. Вайнтрауб) жидкая селективная питательная среда для выделения из крови возбудителей брюшного тифа, содержащая мясопептонный бульон, желчь, индикатор Андраде, глюкозу или маннит … Большой медицинский словарь
Расселла среда — (F. F. Russell, 1870 1960, амер. бактериолог) плотная дифференциально диагностическая питательная среда для идентификации тифозных, паратифозных и дизентерийных бактерий по их ферментативной активности; содержит агар, перевар Хоттингера, лактозу … Большой медицинский словарь
Ра́сселла среда́ — (F.F. Russell, 1870 1960, американский бактериолог) плотная дифференциально диагностическая питательная среда для идентификации тифозных, паратифозных и дизентерийных бактерий по их ферментативной активности; содержит агар, перевар Хоттингера,… … Медицинская энциклопедия
Metal Gear Solid: Peace Walker — Логотип … Википедия
Гисса среды — среды с углеводами и индикатором, используемые для определения сахаролитических св в микробов в процессе их идентификации. Сухие коммерческие среды содержат углевод (глюкозу, лактозу, сахарозу, маннит, мальтозу и др.), индикатор ВР (смесь водного … Словарь микробиологии
Индикатор Андраде
Смотреть что такое «Индикатор Андраде» в других словарях:
Индикатор Андраде — Андраде индикатор предназначен для выявления способности микроорганизмов понижать значение рН питательной среды при ферментативной деятельности. Принцип В присутствии микроорганизмов, имеющих набор ферментов, превращающих различные углеводы в… … Википедия
Андраде индикатор — (Е. P. Andrade, 1872 1906, амер. бактериолог) фуксин содержащий реактив, добавляемый в дифференциально диагностические питательные среды с углеводами для определения гликолитической активности бактерий; при сдвиге pH в кислую сторону питательная… … Большой медицинский словарь
АНДРАДЕ ИНДИКАТОР — Андраде индикатор, реактив, содержащий фуксин; применяется для определения ферментативной активности бактерий при их культивировании на средах с углеводами. При ферментации углеводов и сдвиге pH в кислую сторону среда приобретает красный оттенок… … Ветеринарный энциклопедический словарь
Рапопорт-Вайнтрауба среда — (М. А. Рапопорт; А. Вайнтрауб) жидкая селективная питательная среда для выделения из крови возбудителей брюшного тифа, содержащая мясопептонный бульон, желчь, индикатор Андраде, глюкозу или маннит … Большой медицинский словарь
Расселла среда — (F. F. Russell, 1870 1960, амер. бактериолог) плотная дифференциально диагностическая питательная среда для идентификации тифозных, паратифозных и дизентерийных бактерий по их ферментативной активности; содержит агар, перевар Хоттингера, лактозу … Большой медицинский словарь
Ра́сселла среда́ — (F.F. Russell, 1870 1960, американский бактериолог) плотная дифференциально диагностическая питательная среда для идентификации тифозных, паратифозных и дизентерийных бактерий по их ферментативной активности; содержит агар, перевар Хоттингера,… … Медицинская энциклопедия
Metal Gear Solid: Peace Walker — Логотип … Википедия
Гисса среды — среды с углеводами и индикатором, используемые для определения сахаролитических св в микробов в процессе их идентификации. Сухие коммерческие среды содержат углевод (глюкозу, лактозу, сахарозу, маннит, мальтозу и др.), индикатор ВР (смесь водного … Словарь микробиологии
Пептонная вода с мясным экстрактом (или без него)
Среда является основой, в которую добавляют различные углеводы для изучения их ферментации, например, представителями семейства Enterobacteriaceae.
Состав**:
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 18,1 г порошка M909 или 15,1 г порошка M885 в 1000 мл дистиллированной воды до полного растворения. Разлить в пробирки для тестирования с поплавками. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до комнатной температуры и асептично добавить рабочий раствор того или иного углевода до конечной концентрации 0,5% или 1,0% (вес/об).
Принцип и оценка результата:
Пептонная вода с индикатором Андреде используется для определения сахаролитического профиля различных микроорганизмов. Пептический перевар не содержит собственных углеводов (1, 2), а среда в целом свободна от нитратов (их присутствие может давать скопление газа в поплавках). Индикатор Андреде представляет собой раствор кислого фуксина, доведенного щелочью (гидроксидом натрия) от красного до желтого цвета. При нарастании кислотности среды (в случае ферментации углевода) индикатор меняет цвет с желтого на красный (2). При нагревании среда краснеет, но после остывания приобретает первоначальный цвет. Растворы углеводов рекомендуется стерилизовать отдельно от среды и асептично добавлять после ее стерилизации. Биохимическая идентификация растущих на этой среде микроорганизмов проводится по характеру ферментации сахаров (1, 3, 4).
Для посева рекомендуется использовать только свежие культуры, предварительно идентифицированные по культуральным свойствам и в мазках, окрашенных по Граму. Для окончательной идентификации, как правило, необходимы дополнительные тесты.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок с красными крупинками.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет бледно-розовую окраску, прозрачна без какого-либо преципитата.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор М909 (1,81% вес/об) имеет рН 7,1 ± 0,2.
Водный раствор М885 (1,51% вес/об) при той же температуре имеет рН 7,4 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35°С.
ДЛЯ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ ОТ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ ДРУГИХ СЕМЕЙСТВ
окисление — ферментацию[Hugh R.,
Среда предназначена для установления путей расщепления углеводов бактериями (OF-тсст), что характеризует определенные семейства; у энтеробактерий расщепление углеводов происходит ферментацией, у псевдомонад —окислением. Кроме того, существуют бактерии, у которых метаболизм углеводов полностью отсутствует.
Принцип действия: процесс ферментации, требующий анаэробных условий, кратко изложен при описании принципа действия «Сред с углеводами». Окислительный же процесс расщепления углевода (глюкозы) начинается с прямого окисления его карбоксильной группы и протекает в присутствии атмосферного кислорода.
Натрий хлорид (NaCl) —5 г
Калий гидрофосфат (КаНРО,) —0,3 г
Агар — 3 г
Бромтимоловый синий (1% водный
Вода дистиллированная — 1000 мл
Используют и другой способ приготовления: основу (все компоненты, кроме глюкозы) готовят, как сказано выше, затем разливают в пробирки мерно по 5 мл и стерилизуют при 12ГС в течение 15 мин. Глюкозу в виде 10% водного раствора подвергают стерилизующей фильтрации и добавляют асептически по 0,5 мл в каждую пробирку со стерильной основой. После тщательного перемешивания среду можно использовать. Допустимо хранение при 4 «С 2—3 дня.
Среда с KN03для определения редукции нитратов
Это дифференциальная среда, предназначенная для подтверждения принадлежности испытуемого штамма к энтеробак-териям, а также для дифференциации нейсссрий и некоторых других грамотрицательных бактерий.
Принцип действия: в микробиологии под восстановлением нитратов подразумевается способность микробов редуцировать соли азотной кислоты (нитраты) [МОа
], например калия нитрат, в соли азотистой кислоты (нитриты) [NOa
] с выделением аммиака (NO3) или свободного азота (N2) и других продуктов. Процесс этот осуществляется энтеробактерилмн с помощью фермента питратредуктазы и обычно протекает в анаэробных условиях, где микроорганизм извлекает необходимый кислород из нитратов. Наличие питратредуктазы устанавливают определением с помощью тест-реактива одного из продуктов расщепления нитратов — нитритов. Их определяют по красному окрашиванию среды после добавления тест-реактива, содержащего а-нафтиламин.
Состав: а) Оригинальная пропись:
Вода дистиллированная — 1000 мл
Приготовление: ингредиенты смешивают, устанавливают рН 7,4, разливают в пробирки по 5 мл и стерилизуют при 121 S C 15 мин.
Калий нитрат (KNO3) —0,1 г
Приготовление: Пептонную 1% воду разводят пополам дистиллированной водой, прибавляют натрий хлорид (до концентрации хлоридов 0,5%), вносят калия нитрат, все ингредиенты растворяют и хорошо перемешивают, фильтруют через бумажный фильтр, устанавливают рН 7,1—7,2, разливают в пробирки по 5 мл и стерилизуют при 112 «С 30 мин.
Примечание. Калий нитрат (КМО3) должен быть свободен от нитритов
— 8 г — 1000 мл — 5 г — 6 г — 1000 мл |
Сульфониловая кислота Уксусная кислота (5N раствор) Раствор Б. а-Нафтиламин
Диметил-а-нафтиламип Уксусная кислота (5N раствор)
Приготовление растворов А и Б: соответствующие ингредиенты растворяют при слабом нагревании. Реактивы токсичны, требуют осторожного обращения. Хранить их необходимо в склянках темного стекла с притертыми пробками при 4 °С. Срок годности реагентов 2 — 3 мес (при периодическом контроле на известных тест-штаммах).
Тест-реактивы для определения цитохромоксидазы [Gaby W..+
Hadly С., 1957] в модификации W. Ewing, J. Johnson (1960)
Представители семейства Enterobacteriaceae не обладают ци-тохромоксидазной активностью, что служит для дифференциации их от псевдомонад и некоторых других грамотрицательных бактерий.
Спирт этиловый 95° — 100 мл
Вода дистиллированная — 100 мл
Примечание. Раствор А можно хранить в холодильнике до 10 дней, раствор Б — только один день.
Реактивы для окраски бактерий по Граму
Реактив 1 (для первичной окраски)
Состав: Генцианвиолет или кристалвиолет —1 г
Спирт этиловый 96° — 10 мл
Вода дистиллированная — 100 мл
Приготовление: в ступке растирают краситель с фенолом, постепенно добавляя спирт и воду. Тщательно перемешанную жидкость сливают во флакон, выдерживают сутки и затем фильтруют через бумажный фильтр.
По другому способу смешивают 10 мл насыщенного (4,8%) спиртового раствора красителя со 100 мл 2% феноловой воды.
Реактив 2. Раствор Люголя (в модификации Грама)
Состав: Калий йодид (KI) —2 г
Иод кристаллический — 1 г
Вода дистиллированная —300 мл
Приготовление: йод и калий йодид хорошо размешива
ют в 10 мл воды, оставляют на сутки в мерной колбе, после чего
добавляют воду до 300 мл. •
Реактив 3. Спирт этиловый 96° — 100 мл
Реактив 4. Фуксин феноловый, разведенный
Состав: а) Фуксин основной —10 г
Спирт этиловый 96° — 100 мл
Ингредиенты смешивают и ставят в хорошо закрытом флаконе в термостат на 18—20 ч.
Вода дистиллированная — 100 мл
Приготовление: когда оба раствора будут готовы, добавляют 10 мл раствора фуксина к 100 мл фенолового раствора. При этом получается крепкий феноловый фуксин, который для работы разводят дистиллированной водой 1 :10.
7. СРЕДЫДЛЯ ХРАНЕНИЯ И ПЕРЕСЫЛКИ КУЛЬТУРЯичная среда
Яичную среду используют для хранения и пересылки штаммов.
Состав: Яйцо куриное (свежее, диетическое) —4 шт.
.. Натрий хлорид (0,9% стерильный
.. раствор) — 100 мл
Приготовление-: скорлупу яиц тщательно отмывают, обрабатывают спиртовым раствором йода, затем спиртом и обжигают. Содержимое яиц сличают в банку с бусами и встряхивают до образования гомогенной массы, добавляют раствор натрия хлорида, тщательно перемешивают, разливают в стерильные пробирки по 4—5 мл и стерилизуют в скошешюм положении в аппарате Коха при 80 °С в течение 1 ч, два дня подряд.
Применение: бактериальную культуру засевают частым штрихом тю поверхности среды. Пробирки закрывают стерильными корковыми пробками и заливают парафином.
Полужидкий голодный агар [Крушинская Е. А., 1957|
Принцип действия: основан на том, что невысокое содержание питательных веществ понижает жизнедеятельность бактерий, особенно в условиях хранения при 4—6 °С. Замедленные процессы обмена веществ ограничивают скопления метаболитов, что в свою очередь положительно влияет на сохранение исходных свойств штамма.
Состав: Бульон питательный, содержащий 0,6—0,9% общего азота, рН 7,2—
Приготовление: агар расплавляют в горячем бульоне, фильтруют, разливают по 8—10 мл в пробирки или по 1 мл в мелкие ампулы, стерилизуют при 121 °С 30 мин.
Применение: культуру засевают 1—2 уколами в толщу •среды, помещают в термостат и после 18—20-часового выращивания выросшие культуры оставляют для хранения. Ватные пробки в пробирках заливают парафином или заменяют на стерильные корковые, ампулы запаивают. Штаммы хранят при 4— 6°С, пересевают через 2—3 мес.
Питательный желатин [Хоменко Н. А., Дмитровская Т. С., 1962]
Питательный 10% желатин, разлитый в ампулы, может служить средой для сохранения и пересылки культур.
Приготовление среды описано ранее.
Бактериальные культуры, засеянные уколом в ампулы со средой, после 18—20 ч подращивания помещают в холодильник в запаянных ампулах. Проверку состояния и пересевы сохраняемых штаммов производят через 1—2 года.
ИНДИКАТОРЫ
Индикатор Андреде
Состав: Фуксин кислый — 5 г
Натрий гидроокись (NaOH)
1 N раствор — 150 — 180 мл
Вода дистиллированная — 1000 мл
Приготовление: кислый фуксии растворяют в воде и добавляют раствор щелочи, перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 24 ч, периодически встряхивая. Цвет должен измениться от красного до коричневого. Если цвет не изменился, то добавляют еще 10 мл щелочи и выдерживают индикатор еще 1 сут.
По другой прописи смешанные ингредиенты выдерживают 24 ч в термостате при 37 °С и затем 48 ч при комнатной температуре на свету.
Хранят готовый индикатор в бутыли темного стекла с притертой пробкой в обычных условиях.
Бромтимоловый синий(0,2% щелочной раствор)
Состав: Бромтимоловый синий —1г
Натрий гидроокись (NaOH) 0,1 N
раствор —25мл
Вода дистиллированная —475. мл
Бромтимоловый синий(1,6% щелочной раствор)
Соста.в: Бромтимоловый синий — 1,6 г
Натрий гидроокись (NaOH) 0,25 N
раствор — 20 мл
Вода дистиллированная —80 мл
Феноловый красный(0,2% щелочной раствор)
Состав: Феноловый красный —1’г
Натрий гидроокись (NaOH) 0,1 N
раствор —40 мл
Вода дистиллированная —460 мл
Феноловый красный(1,6% щелочной раствор)
Состав: Феноловый красный — 1,6 г
Натрий гидроокись (NaOH) 0,25 N
раствор — 20 мл
Вода дистиллированная —80 мл
Феноловый красный(0,4% водный раствор)
Состав: феноловый красный —0,1 г
Вода дистиллированная стерильная —25 мл
П римечание. Раствор хранят при 4 °С не долее 10 дней.
Феноловый красный(0,2% спиртовой раствор)
Состав: Феноловый красный Спирт этиловый 50%
Бромкрезоловый пурпурный(1,6% спиртовой раствор)
Состав: Бромкрезоловый пурпурный —1,6 г
Спирт этиловый 96″ — 100 мл
Крезоловый красный(0,1% спиртовой раствор)
Состав: Крезоловый красный —0,1 г
Спирт этиловый 96° — 100 мл
Бриллиантовый зеленый (0,1 или0,5% водный раствор)
— 0,1или 0,5 г — 100 мл |
Состав: Бриллиантовый зеленый Вода дистиллированная Кристаллический фиолетовый(0,01% водный раствор)
Состав: Кристаллический фиолетовый —0,01 г
Вода дистиллированная —100мл :
Метиленовый синий(1% водный раствор)
Состав: Метиленовый синий —1 г
Вода дистиллированная — 100 мл
Розоловая кислота(5% спиртовой раствор)
Состав: Розоловая кислота —5 г
Спирт этиловый 96° — 100 мл
Приготовление индикаторных растворов: сухое красящее вещество растирают в ступке с постепенным добавлением горячей воды, щелочи или спирта (в зависимости от характера изготавливаемого раствора). Затем жидкость осторожно, смывая ступку, переносят в мерную колбу, добавляя необходимое количество води или спирта. Колбу плотно закупоривают и помещают на 2—3 дня в термостат (37″С).
После этого индикатор фильтруют через многослойный бумажный фильтр и хранят в темных флаконах с притертыми
Срок годности не более 1—2 мсс, кроме водного раствора фенолового красного, который можно хранить в холодильнике только до 10 дней.
Индикатор Андреде, 125 мл (ФСЗ 2008/01440)
Кат. № I001-125ML
Вы можете добавить товар в корзину, указав количество
Производитель: HiMedia Laboratories
Вид упаковки: картонная коробка
Кислотно-щелочной индикатор представляет собой раствор кислого фуксина, который при титровании гидроксидом натрия меняет цвет от розового до желтого в зависимости от рН среды. Используется для дифференциации микроорганизмов по способности к ферментации определенных углеводов в питательных средах
Функциональное назначение
Тесты биохимической идентификация микроорганизмов, визуализация использования углеводов в дифференциально-диагностических средах Гисса.
Входит в состав Пептонной воды M885 и M909, CLED агара M352.
При кислом рН (рН 5,0) становится розовым, сохраняет желтый цвет в щелочной среде (рН 8,0)
Технические характеристики
Состав: кислый фуксин, 1N натрия гидроксид, дистиллированная вода.
Раствор светло-желтого цвета, прозрачный, без какого-либо осадка.
Хранить при температуре ниже +10. 30 °C плотно закрытым, в защищенном от прямых солнечных лучей месте.
Использовать до даты срока годности, указанного на этикетке.
Зарегистрировано в Росздравнадзор
Документация и инструкции
Вся представленная на сайте информация, касающаяся технических характеристик, наличия на складе, стоимости товаров, носит ознакомительный характер и ни при каких условиях не является публичной офертой, определяемой положением пунктом 2 статьи 437 Гражданского кодекса Российской Федерации. Всю подробную информацию о товарах, их наличии и стоимости Вы можете получить у менеджеров отдела клиентского сервиса.
На данном сайте используются файлы cookie (куки) в целях совершенствования работы сайта и получения аналитической информации. В случае несогласия, просим произвести соответствующие настройки в браузере или покинуть данный сайт. Оставаясь на www.art-medika.com, Вы принимаете нашу политику конфиденциальности. Заполняя форму заявки, Вы подтверждаете свое согласие на обработку персональных данных.
© 2012-2019 Арт-Медика оборудование, реагенты, изделия медицинского назначения для клинической лабораторной диагностики