Кавитирующая морула что это
Почему происходит остановка развития эмбрионов?
В чём причина остановки развития эмбрионов?
Существуют несколько причин по которым женщина не получает долгожданный перенос эмбрионов во время проведения протокола ЭКО, потому что прекращается процесс их деления. Статистика утверждает что 15-20% оплодотворенных яйцеклеток останавливаются в своем делении в процессе размножения на стадиях 3-4 клетки на вторые сутки. Останавливается деление яйцеклеток – по причине естественного процесса. Природный естественный отбор, позволяющий предотвратить зарождение плода с генетическим отклонением.
Современная эмбриологическая лаборатория в которой они культивируются оснащена специальным оборудованием, которое позволяет осуществлять процесс деления яйцеклетки с отработанной до мельчайших подробностей технологическими тонкостями.
Опираясь на прогрессивные технологии и высокотехнологичное оборудование обеспечивающее стабильные условия культивирования и развитие эмбриона после переноса, причину остановки в развитии и их делении следует рассматривать исключительно в плоскости жизнестойкости самого генетического материала.
Развитие эмбриона при ЭКО поэтапно дням:
Дата когда проводится пункция яичников и производится забор сперматозоида донора называется нулевой датой дня. Начало срока формирования плода начинается от момента смешивания сперматозоидов и ооцитов в специальной подготовленной специалистами среде. Результат зачатия возможно увидеть после 17 часов, с момента смешиваний мужской и женской гаметы. После 18 часов возможно рассмотреть в стадии зиготы – эмбрион с женскими или мужскими ядрами. Новый сформированный плод имеет диплоидный набор хромосомы и полученный от родителя индивидуальный генотип.
На 2 сутки нахождения плода в зиготе начинается его разделение, его клеточный состав называют бластомером, этих клеток в норме наблюдают по 2-4.
На 3 день он должен выделить шесть или восемь бластомеров. Это решающий этап создания зародышей: при обнаружении генетических дефектов, ход дальнейшего процесса останавливается, и он перестает существовать. Связывают это с тем, что в первичные часы после оплодотворения эмбрион питается питательным веществом и энергией материнской клетки, в следующие часы у него должен включиться собственный механизм жизнеобеспечения. Если он имеет генетический дефект, значит механизм не включается и он погибает.
На 4 сутки развития эмбриона при ЭКО у него сформировывается 10-16 бластомеров, процесс переходит в этап морула. В природе, находясь в организме женщины в этот период характеризуется попаданием эмбриона из маточного прохода в проход полости в матки. За четвёртые сутки образования морула сформировывается полостной объем, в котором клетка разделяется на одну и вторую группу. Когда полостное пространство заполняет большую половину клетки, процесс превращения морулы перетекает в стадию бластоцисты.
На 5-6 день развития эмбриона при ЭКО они совершенно сформированы, именно в этот период врачи репродуктологи культивируют плод в полость матки. Физиология искусственного состава среды не позволяет им выживать до 6 суток. Объем бластоцист равномерно расширяется, следовательно истончается ее оболочка. Возможен ее разрыв и ожидаемый выход плода, полностью сформированного для внедрения в слой эндометрия. Врачи это называют хетчингом. В варианте когда толщина оболочки чрезмерно толстая и плод не имеет возможности прорвать её сам, ему помогают это сделать. Эта процедура называется вспомогательный хетчинг. При помощи вспомогательного хэтчинга можно извлечь плоды с самым высоким качеством, и даже продиагностировать их генотип перед проведением имплантации.
На 7 день после проведения протокола ЭКО он помещается в слой эндометрия находящийся в полостном пространстве маточной трубы. Наружные клетки перестраиваются в плаценту, а внутренние в тело будущего ребёнка.
На 8 день наружные поверхностные ткани клетки формируют множество трубчатых ворсинок называемых трофобластомой. При помощи них обеспечивается питательная среда плода и начинает поступать кислород. В этом периоде формирования плод называют гаструлой.
На 9 сутки он все дальше перемещается в слой эндометрия. Начинается процесс переноса плода — имплантации. Возможно кровотечение из поврежденных ооцитов.
На 10 день заканчивается этап имплантации и начинается формирование плаценты. На 11 день плацентарные макрофаги уже синтезируют ХГЧ.
На 13-14 день ХГЧ попадая в кровь и концентрируясь в ней до достаточного уровня чтобы определить факт долгожданного зачатия.
Остановка эмбриогенеза при ЭКО, причины
Выше перечислены множественные причины остановки или неправильного формирования эмбриона после проведения ЭКО. Основным пунктом по мнению учёных генетиков всё же является проблема генетической аномалией. Она проявляется на стадиях зиготы, на 3 день, после переноса плода в слой эндометрия.
Замершая беременность. Причина остановки развития беременности
Наблюдаются случаи невынашиваемости беременными своего плода. Останавливается развитие плода в первых днях триместра. Это говорит об абсолютном физиологическом характере остановки. Причина кроется в искусственном отборе, связанном с решением материнского организма. Другими словами, биологический фактор женщины анализирует произошедшее оплодотворение, и если плод имеет дефект, то организм перестает подпитывать такую беременность. Он принимает решение о переносе и прекращении процесса развития плода и его отторжении, чтобы не расходовать силы своего биологического ресурса. Этим объясняется остановка развития эмбрионов.
В процессе оплодотворения может участвовать немалое количество плодоносных яйцеклеток которые могут иметь изъяны в хромосомном строении с самого начала своего формирования. Эти возможные эмбриональные дефекты трудно перенести и выявить на начальном этапе формирования эмбрионов, а тем более их подкорректировать в процессе. Всё это называется расплатой за излишек биологического разнообразия.
Репродуктологи наблюдают случаи когда остановка беременности происходит до имплантационного момента: интеллект женского организма не принимает данные сигнальных посылов о наступлении беременности. В жизни женщины наступает обычный месячный цикл, начинается менструация. Беременность не наступает.
Оценка качества эмбрионов в программах ЭКО
Несмотря на то что результативность программ ЭКО зависит от множества факторов, главным и решающим этапом, практически определяющим успешность программы, является эмбриологический. А так как различные манипуляции с эмбрионом человека – это передний край современной науки, можете представить себе сложность терминологии, которую используют эмбриологи в своей повседневной деятельности. Ясности не добавляет и обилие различных классификаций и методов оценки качества используемых клеток.
Мы постараемся доступным языком объяснить, что подразумевается под непонятными сочетаниями букв и цифр и дать понимание того, на основе каких данных врачи принимают решения и дают прогнозы на исход программ ЭКО.
Главный эмбриолог, к.б.н.
Хотим сразу предупредить — ни в коем случае не стоит забывать, что для того, чтобы самостоятельно оценить перспективы и принять решение о переносе эмбриона нужно быть настоящим специалистом, имеющим помимо специального образования достаточный опыт.
В каждом конкретном случае решение и прогноз основывается на совокупности всех известных данных и чаще всего является коллективным решением врача и эмбриолога. Главная сложность состоит в том, что каждому этапу развития эмбриона соответствует своя система оценки качества и способ записи этой оценки. И для того чтобы понимать обозначения вроде «8с» необходимо хотя бы немного разобраться в содержании этих этапов и сопутствующих терминах.
День первый
На первом этапе эмбриолог оценивает признаки оплодотворения после проведенной процедуры ЭКО, ИКСИ, ИМСИ или PICSI. На этом этапе в эмбрионе оценивают наличие, количество, симметричность, внутреннее строение и внешний вид пронуклеусов.
Пронуклеусы — это ядра мужской и женской половых клеток еще не слившихся и несущих одинарный набор хромосом.
По их количеству и внешнему виду оценивают жизнеспособность эмбриона и перспективы возникновения патологий. В норме их должно быть два, они должны иметь относительно равные размеры, находиться рядом и иметь внутри «ядрышки» — пронуклеоли тоже в определенном количестве и расположенные определенным образом. На этом этапе может формироваться множество патологий, например, при присутствии только одного пронуклеуса оплодотворение и не сможет произойти, ведь именно это образование и есть носитель генетического материала, а без участия противоположного пола размножаться мы еще не научились. Пронуклеусов может оказаться и три. Такие эмбрионы часто несут аномальный, тройной набор хромосом и нежизнеспособны. Обычно они погибают до имплантации (прикрепления к стенке матки) или приводят к замершей беременности. Такие эмбрионы отбраковываются и не используются в программах ЭКО.
День второй
Вторые сутки знаменуются соединением ядер женской гаметы и мужской, а также процессом дробления зиготы, которая на этой стадии становится эмбрионом. Численность бластомеров (эмбриональных клеток) – 2–4, но их объем не увеличивается.
Дробление эмбрионов оценивается специалистом по таким критериям:
Уровень фрагментации и численность бластомеров классифицируется по типам следующим образом:
Самый качественный эмбрион — 4А, где 4 — количество бластомеров, А — отсутствие фрагментации.
Эмбрион на второй день
День третий
Продолжается дробление эмбриона, у которого насчитывается от 4 до 9 бластомеров. В начале третьего дня развития запускается собственная генетическая программа, которая в некоторых случаях содержит «опечатки». До этого эмбрион для своего роста «пользуется» веществами, накопленными яйцеклеткой во время ее созревания. Если эмбрион имеет мутации в программе («блок развития»), то далее он не развивается. Это происходит примерно в 20% случаях.
Причиной «блока развития» может быть низкокачественная семенная жидкость или яйцеклетка. Изначальное неудовлетворительное развитие эмбриона свидетельствует о проблемах с яйцеклеткой, если эмбрион «страдает» с третьих суток культивирования, то сперма была ненадлежащего качества. «Блок развития» – это так называемый естественный отбор, эволюционный спасительный механизм, который останавливает развитие некачественных эмбрионов. Как в дальнейшем будет развиваться и расти эмбрион зависит от сформированного генома и своевременности начала его функционирования.
Эмбрион на третий день
День четвертый
К этому сроку эмбрион содержит до восьми бластомер. Клетки контактируют значительно активнее, поверхность у эмбриона немного сглаживается. Культивирование эмбриона третьи сутки характеризуется началом такого процесса, как компактизация, когда границы эмбриональных клеток различить невозможно. Компактизация бывает частичная или полная. Если этот процесс произошел на второй день, то возможно эмбрион развивается неправильно, с отклонениями, что отображается в эмбриологическом протоколе. Готовится переход эмбриона в бластоцисту.
В моруле (трехдневный эмбрион) содержится до 16 бластомеров.
При естественном зачатии на этом сроке эмбрион транспортируется из фаллопиевых труб в матку. По окончании четвертых суток происходит кавитация, когда внутри эмбриона образуется пустота. В процессе эмбрионального роста за пределы зародышевой оболочки выходит определенное количество клеток. Эти клетки при необходимости генетического исследования забирают на анализ. Диагностику проводит эмбриолог на 5–6 сутки, прокалывая зародышевую оболочку. Биопсия абсолютно безопасна для эмбриона и не вредит его развитию. До получения диагностических данных эмбрионы криоконсервируют.
Результаты исследования напрямую повлияют на дальнейшую «судьбу» эмбриона, характеристики которого никак не меняются после размораживания. Современные безопасные технологии замораживания биоматериала позволили широко внедрить в различные программы ВРТ генетическую диагностику. На четвертый день оценка эмбриона малоинформативна, но его можно оценить по численности компактизированных клеток. Чем больше таких клеток, тем вероятнее эмбрион станет бластоцистой.
Оценивание компактизации происходит по классам:
Не во всех лабораториях происходит оценка по такому критерию.
Четвертый день развития. Стадия морулы
День пятый
На данном этапе, включающем период с конца четвертого до начала шестого дня, морула, полость которой составляет половину своего объема, становится бластоцистой, состоящей из двух типов клеток:
Ооцит окружен блестящей оболочкой плотной консистенции (Zona pellucida), выполняющей две функции: она препятствует проникновению в яйцеклетку более одного спермия и удерживает вместе бластомеры. По мере роста внутриэмбриональная полость расширяется, приводя к разрыву оболочки, в результате чего происходит выход бластоцисты или «хэтчинг» (вылупление). На этом этапе оценка эмбриона происходит по таким критериям:
Качество обозначается цифрами (1–5), количество — буквами (А-С).
На пятый день бластоцисты переносят в матку или замораживают. Бластоцисты оценивают по степени зрелости (бластуляция):
Шестой день развития. Стадия бластоцисты
Оценка эмбриобласта
Важнейший критерий внутриклеточной массы (ВКМ) – плотность, сгруппированность. Эмбрион считается более качественным, если отмечается высокая плотность ВКМ.
Критерии трофэктодермы – количество и маленький размер:
Степень приживаемости эмбрионов в полости матки оценивают спустя две недели по исследованию крови на ХГЧ. Более достоверная информация будет получена с помощью УЗ-диагностики через три недели. Вероятность наступления беременности зависит во многом от качества имплантированных эмбрионов. Морфологические данные, используемые для оценивания эмбрионов, являются необходимыми и основными, но этого не всегда достаточно. Иногда при переносе высококачественных эмбрионов они не имплантируются. В других случаях при переносе эмбрионов невысокого качества наступает беременность. Поэтому эмбриологи используют дополнительные варианты оценивания, позволяющие спрогнозировать имплантацию.
Развитие эмбрионов является сложным трудоемким процессом, в котором нужно учитывать массу тонких нюансов, что под силу только высокопрофессиональным специалистам. Если в ходе проведения программы ЭКО удалось довести 40% эмбрионов до этапа бластоцисты отличного качества, то программа считается успешной.
В этом плане криотехнологии, применяемые в протоколах ЭКО, неоценимы, поскольку есть возможность не только перенести в матку высококачественные эмбрионы, но и заморозить оставшиеся. Это преимущество позволяет использовать криозамороженный биоматериал при следующем переносе, минуя несколько небезопасных для здоровья и дорогостоящих этапов.
Данная статья не может быть использована для постановки диагноза, назначения лечения и не заменяет прием врача.
Какой оптимальный день для переноса эмбрионов при ЭКО?
День переноса эмбрионов при ЭКО определяет эмбриолог. От чего это зависит? От количества эмбрионов хорошего качества. Если эмбрионов более 3-4, то врачи принимают решение культивировать их дальше до стадии бластоцисты. Если качественных эмбрионов не более двух, то их переносят как можно раньше: материнский организм наилучшая для них среда. В условиях культивирования in vitro (в пробирке) до стадии бластоцисты доживает половина эмбрионов. При пересадке эмбрионов обязательно учитывается количество предыдущих попыток ЭКО у женщины и дни, на которые они проводились.
Этапы развития оплодотворенной яйцеклетки вне организма
На 5-6-й день развития эмбрион называется бластоцистой. Формирование бластоцисты допускается с конца 4х суток развития, но чаще это происходит на 5-е сутки. Бластоцист на этой стадии имеет трофобласт, который отвечает за имплантацию в маточный эпителий. Чем больше полость внутри бластоцисты и лучше развит трофобласт, тем больше возможность эмбриона к имплантации. Теперь, зная, что происходит с эмбрионом каждые сутки можно сделать вывод, какой день переноса эмбрионов оптимальный.
Дни переноса эмбриона в полость матки
Тем не менее, перенос эмбрионов на 4 день имеет отрицательный момент – возможная остановка в развитии всех эмбрионов, причиной которой может быть также негативное влияние условий культивирования. Отсутствие эмбрионов на перенос является серьезный стрессом для пациентки.
Перенос эмбрионов на 5 день (стадия бластоцисты) оптимален с точки зрения возможности имплантации в матке. Частота имплантации эмбриона на стадии бластоцисты выше, чем 2-3-х-дневных эмбрионов. К этому времени выжили и развиваются сильнейшие эмбрионы, есть возможность проведения генетической диагностики. Имеется эффективная оценка качества бластоцист. При переносе эмбриона на стадии бластоцисты достаточно переносить одного или двух эмбрионов, при переносе на более ранних стадиях подсаживают значительно больше эмбрионов.
Несмотря на это, перенос эмбрионов на 5 день встречается редко, из-за неспособности культуральных сред поддерживать рост эмбриона до стадии бластоцисты. Перенос эмбрионов на 5 день производят при получении 6 и более качественных эмбрионов. Появляются более совершенные системы, включающие несколько культуральных сред, имеющих различный состав в соответствии с меняющимися потребностями эмбриона.
Если изначально яйцеклеток отобрано мало, то имеется риск не получить эмбрионов на перенос вообще. Как видно, у каждого варианта имеются плюсы и минусы. Большое значение имеет опыт эмбриолога и оснащение клиники. В каждой конкретной ситуации вопрос решается индивидуально.
Под микроскопом эмбриолога. Эмбриологический этап в процедуре ЭКО.
Кто такой эмбриолог
Знакомьтесь – эмбриологи. Редкие и уникальные кадры, биологи по образованию. Именно они работают над тем, чтобы «чудо» случилось – оплодотворение и зарождение эмбрионов. Это они оценивают качество эмбрионов и принимают решение: из какого эмбриона получится ваш малыш. Это высококвалифицированные специалисты, которые не только работают день и ночь, но и постоянно учатся, перенимая новые тенденции в науке.
Как развивается эмбрион
В первый день после пункции яйцеклетка превращается в зиготу. Возможно, многие помнят этот термин из школьной биологии. На этом этапе мы видим двойной набор хромосом – 23 хромосомы женщины и 23 хромосомы мужчины. Если образовались два шарика – пронуклеусы – значит, оплодотворение прошло хорошо.
После этого, ночью, происходит первое дробление клетки. Второе, утреннее дробление эмбриологи начинают активно наблюдать. На этот момент они уже видят четырехклеточный эмбрион. На третьи сутки – восьмиклеточный эмбрион. Все эти дни с эмбриона не сводят глаз. Ведь его поведение учитывается при оценке.
На четвертые сутки 10-16 клеток эмбриона сливаются воедино, образовалась морула. И вот, наконец-то, пятый день – бластоциста. Эмбрион, который готов к переносу. Ведь на пятый день он уже имеет сложную структуру, состоящую из 128 клеток. На этой стадии эмбрион обладает наибольшей способностью к имплантации, так как уже преодолел препятствия, возникающие на разных стадиях дробления.
Три или пять дней?
Мы культивируем эмбрионы пять дней. Это очень дорогое удовольствие: гигантская нагрузка на эмбриологическую службу, постоянная смена дорогостоящих сред. Задействовано много инкубаторов. Ведь моделируется маточная труба, она вырабатывает различные вещества, которые эмбриологи заменяют специальными средами.
Если в результате стимуляции у нас получилось много яйцеклеток, то эмбрион будет всегда переноситься на пятые сутки. Эмбриологи дают развиться эмбрионам, чтобы выбрать самого сильного. Ведь если эмбрион дожил до 5 дней в искусственной среде, вероятность того что он приживется в матке возрастает.
В тех случаях, когда было получено не много клеток, и созревает только один эмбрион – может быть принято решение о переносе на третий день. Так специалисты дают возможность эмбриону дозреть в матке, пытаясь всеми силами увеличить шансы на беременность.
Предпочтение отдается все-таки переносу на пятый день, потому что на пятый день остаются самые жизнеспособные эмбрионы. Слабые эмбрионы погибают между третьим и пятым днем.
Пять дней – это целая жизнь для эмбрионов, за этот период они постоянно меняются. На третий день он может казаться качественным, а к пятому дню все может кардинально измениться.
Благодаря системе, которая позволяет культивировать эмбрионы пять дней, в случае, если эмбрионы дожили до этого дня – у нас есть гарантии того, что это жизнеспособные эмбрионы.
Самое интересное. Как происходит отбор
Итак, как вы знаете, каждому эмбриону дают оценку. Существует несколько признанных классификаций эмбрионов. В Клинике Нуриевых используется классификация по Гарднеру. Что это такое? Например, возьмем самый лучший эмбрион. Эмбриологи шутливо называют такой эмбрион «отличник» – 5АА. Первая буква показывает качество внутриклеточной массы (ВКМ) – внутренний слой эмбриона, который дает начало плоду. Чем больше внутренняя масса, тем вероятнее – это А, если мельче – B, совсем мало – С.
Вторая буква – оценка внешнего слоя эмбриона – трофобласта. Цифра постоянно меняется, так как эмбрион растет. Цифру можно не писать, она не существенна при оценке.
Получились разные эмбрионы, всем присвоили разные буквы и цифры. Как же эмбриолог будет выбирать? 5АА – базовая система оценки, но она не дает полной информации для выбора эмбрионов.
«Репутация» эмбрионов
Иногда из двух эмбрионов с разными характеристиками, например, 5АА и 5АB, эмбриолог выбирает для пересадки второй эмбрион, с «неидеальными», казалось бы, показателями. Только на первый взгляд показатели «неидеальны», потому что не только качество двух оболочек определяет жизнеспособность эмбриона. Еще один важный критерий – репутация эмбриона. В нашем примере у эмбриона 5АВ она оказалась лучшей.
Репутация эмбриона складывается из множества факторов, полученных в процессе наблюдения за их «поведением» с 1 по 5 день жизни. Учитывается все: какой эмбрион развивался лучше, какой быстрее дробился, как вел себя на каждом этапе – все это в итоге влияет на судьбу эмбриона.
В любом случае, пациенту могут перенести эмбрионы любого класса. Да, эмбрион с показателями АС слабее, чем АА, но у каждого эмбриона, который дожил до пятого дня, всегда есть шанс на дальнейшую жизнь, и из каждого эмбриона может получиться ребенок. Эти показатели лишь первая видимая, но не единственная его характеристика. Окончательную верную оценку эмбриону может дать только специалист эмбриологической лабораторий. Поэтому делать преждевременные выводы, узнавая показатели своих эмбрионов, ни в коем случае нельзя.
Также надо отметить, что качество эмбриона не имеет прямой связи с шансами и исходами беременности. Каждый случай индивидуален.
Заморозка эмбрионов
В первом стимулированном протоколе мы выбираем самые лучшие эмбрионы и переносим их, – остальные эмбрионы замораживаются. Это позволит Вам получить следующую беременность с меньшими финансовыми затратами и без стимуляции в криопротоколе. Еще несколько лет назад после заморозки и разморозки исходы были хуже, чем в свежих протоколах. Сегодня доказано: свежие и замороженные эмбрионы, имеют абсолютно одинаковые шансы. Наука движется вперед и современные среды для заморозки идеальны, и обеспечивают выживаемость эмбрионов свыше 90 процентов.
В нашей Клинике заморозке подлежат только те эмбрионы, которые смогут ее пережить, и соответственно, дать начало беременности уже после разморозки.
У эмбриологов есть четкая сложная инструкция, по которой происходит отбор эмбрионов для заморозки. На решение влияет множество факторов: качество бластоцисты, репутация эмбриона, какой у женщины по счету протокол, какой диагноз и т.д. Принять правильное решение, о том, какой эмбрион замораживать может только эмбриолог.
Как замораживаются эмбрионы? Только методом витрификации. Витрификация – мгновенный способ заморозки, с добавлением специальных растворов – криопротекторов, которые исключают образование кристаллов льда, повреждающих клетки. Механические повреждения сводятся к нулю. Благодаря этому выживаемость эмбрионов составляет более 90 процентов. В нашей Клинике этот метод начал применятся с самой первой заморозки и используется по сегодняшний день.
Вы – наш пациент, и мы заботимся о Вас. И мы знаем, как непросто проходить через протокол ЭКО.
Все те пять дней, которые требуются эмбриону для полноценного развития, Вам хочется знать, что с ним происходит. Мы написали эту статью, чтобы объяснить вам суть этого сложного этапа.
В эмбриологической лаборатории нашей Клиники созданы идеальные условия для культивирования и хранения эмбрионов. Доверьтесь своему врачу и эмбриологам, они помогут вам найти оптимальный вариант.
Помните, что над вашим протоколом ЭКО трудится не только врач, а вся команда Клиники Нуриевых, которая каждый день думает над тем, как сделать ваше лечение комфортным и эффективным. Постарайтесь провести эти дни в приятных эмоциях и просто отдохнуть. Тогда, все вместе, мы обязательно добьемся успеха.