Методом ифа что это такое

Что такое ИФА и для чего он применяется?

ИФА — иммуно — ферментный анализ, отличающийся высокой информативностью и точностью результатов, при достаточной оперативности и безболезненности проведения.

Иммуно ферментная диагностика поступила в арсенал медицинских специалистов в 60 — х годах прошлого столетия. На тот момент это был очень сложный, но перспективный анализ. С высоты прошедших десятилетий можно уверенно сказать, что предполагаемый потенциал ИФА раскрылся в полной мере.

Какова область применения ИФА?

Область применения рассматриваемого метода диагностики в современной медицине достаточно широка, при этом основными направлениями являются:

Как работает рассматриваемый метод диагностики?

Метод ИФА использует два основных инструмента: иммунная реакция и ферментная реакция, на практике оба инструмента взаимодействуют, обеспечивая желаемый результат и высокую информативность. Иммунная реакция широко применяется для поиска причин возникновения болезни, болезнетворных бактерий и микробов. В вою очередь, ферментная реакция используется для того, чтобы перевести полученные результаты в форму, доступную для исследований и измерений.

Для диагностики каких заболеваний применяется рассматриваемый метод?

С помощью ИФА можно подтвердить или опровергнуть наличие у человека большого количества заболеваний, наиболее распространенными на сегодняшний день являются:

Как осуществляется подготовка к проведению такого анализа?

Для того, чтобы результаты рассматриваемого метода диагностики оказались достаточно достоверными, «разговорчивыми» и информативными, пациенту следует помнить о правилах забора крови для проведения анализа. Наиболее значимыми, обязательными к соблюдению, являются:

Каковы сроки выполнения такого анализа?

После забора крови результат будет доступен пациенту в течение двух суток, то есть выполняется такой анализ достаточно быстро, несмотря на определенную сложность исследования.

Подводя итог, хочется сказать следующее: иммуно — ферментный анализ — достаточно эффективное, высокоточное исследование, отличающееся высокой информативностью при высокой оперативности проведения.

Сдать кровь на ИФА вы можете в нашей клинике

Источник

Иммуноферментный анализ

Иммуноферментный анализ (ИФА) — один из видов иммунохимического анализа. Он основан на высокоспецифической иммунологической реакции антигена (АГ) с соответствующим антителом (АТ) с образованием иммунного комплекса. При этом один из компонентов конъюгирован с ферментом. В результате реакции фермента с хромогенным субстратом образуется окрашенный продукт, количество которого можно определить спектрофотометрически.

Любой вариант ИФА содержит 3 обязательные стадии:

В реакции участвуют:

Твердая фаза

В качестве твердой фазы для проведения ИФА можно применять различные материалы: полистирол, поливинилхлорид, полипропилен и другие. Твердой фазой могут служить стенки пробирки, 96-луночные и др. планшеты, шарики, бусины, а также нитроцеллюлозные и другие мембраны, активно сорбирующие белки.

Антигены и антитела

АГ и AT, используемые в ИФА, должны быть высокоочищенными и высокоактивными. АГ должны обладать высокой антигенностью, оптимальной плотностью расположения и количеством антигенных детерминант.
Чувствительность ИФА зависит от концентрации, активности и специфичности используемых антител. Используемые АТ могут быть поли- или моноклональными, различного класса (IgG или IgM) и подкласса (IgG1, IgG2).
Чувствительность и специфичность метода повышается при использовании моноклональных антител. В этом случае появляется возможность обнаруживать низкие концентрации АГ (AT) в образцах.

Ферментные маркеры: наибольшее применение нашли пероксидаза хрена (ПХ), щелочная фосфатаза (ЩФ) и β-D-галактозидаза.

Субстраты

Выбор субстрата, в первую очередь, определяется используемым в качестве метки ферментом, так как реакция «фермент-субстрат» высокоспецифична.

Классификация ИФА

В основу классификации методов ИФА положено несколько подходов:

1 — по типу реагентов, присутствующих на первой стадии ИФА:

2 — по принципу определения исследуемого вещества:

3 — по типу результатов:

Конкурентный ИФА

Конкурентный ИФА для определения антител: искомые антитела и меченые ферментом антитела конкурируют друг с другом за антигены, сорбированные на твердой фазе.

Неконкурентный «сэндвич» – вариант ИФА

Основным достоинством метода является высокая чувствительность, превосходящая возможности других схем ИФА.

Качественный анализ часто используют при скрининговых исследованиях и диагностике инфекционных заболеваний. Результат исследования определяется при сравнении его оптической плотности с расчетной величиной критической оптической плотности (ОПкрит., «Cut-off»).

Формулу для расчета «Cut-off» указывают в инструкции к тест-системе. В расчете «Cut-off» могут участвовать как усредненные значения оптических плотностей положительных и отрицательных контролей, так и оптическая плотность специального контрольного образца — контроля уровня среза.
Если оптическая плотность образца выше, чем Cut-off, образец считается положительным на специфические антитела.

Для полуколичественного варианта проведения методики рассчитывают отношение между средней оптической плотностью образца и оптической плотностью Cut-off.

Образцы рассматриваются как:

Сомнительные результаты анализа нельзя однозначно интерпретировать и для уточнения результата необходимо повторить обследование через 1–2 недели.

Методом ИФА определяют:

Источник

ИФА и ПЦР: просто о сложных лабораторных методах диагностики инфекций

Опубликовано 29 ноября 2014 пользователем a.ultanbay

В лабораторной диагностике существует множество методов выявления необходимого элемента в биоматериале. Для диагностики инфекционных заболеваний чаще всего используют два принципиально разных метода: ИФА и ПЦР. Мы предлагаем Вам ознакомиться с данными методами, чтоб понять плюсы и минусы каждого из них.

ПЦР – один из самых наукоемких методов. Он обнаруживает ДНК микроорганизма. Генетический материал индивидуален для любого микроба, а это значит, что метод обладает самой высокой специфичностью и не может «обознаться». Принцип ПЦР заключается в том, что в пробирке происходит многократное удвоение искомого генетического кода. В случае присутствия даже незначительного количества этого кода, произойдет увеличение его количества, и анализатор сможет «уловить» его наличие. Таким образом, ПЦР – «золотой стандарт» выявления инфекционных агентов. Однако, у этого метода есть и свои минусы. Во-первых, в отличие от ИФА, ПЦР может сказать о наличии возбудителя только в месте взятия биоматериала, которое ограничено мазком (например, с уретры или из носа). Во-вторых, за счет своей высокой чувствительности, ПЦР может обнаружить даже мертвые частицы микробов, что наблюдается сразу после лечения. В таком случае, результат будет ложноположительный.

Резюмируя вышесказанное, приведем таблицу сравнения этих двух методов друг с другом:

Источник

Анализ ИФА

Методом ИФА можно определить уровень гормонов, иммуноглобулинов, иммунологических комплексов и других биологически активных веществ. Материалом для исследования может служить кровь (ИФА крови), спинномозговая жидкость, содержимое стекловидного тела, околоплодные воды и т.д.

Преимущества, которыми располагает ИФА по сравнению с другими методами детекции антигенов и антител:

Метод иммуноферментного анализа используется для определения наличия антигенов возбудителей различных инфекций и для определения наличия антител классов (IgA, IgM, IgG) к антигенам различных возбудителей (вирусные гепатиты, ВИЧ, сифилис, TORCH, хламидиозы, паразитозы). С помощью ИФА можно определить антитела к любой инфекции, при условии, конечно, что организм их выработал. Этот метод позволяет различать острые и хронические формы заболеваний, выделять стадию заболеваний и выявлять практически здоровых носителей и контролировать вакцинацию. Необходимо заметить, что наличие антител в сыворотке крови или в патологическом материале может свидетельствовать лишь о контакте организма с возбудителем в настоящее время или в прошлом.

Для постановки диагноза, ИФА диагностики, используют лабораторные тесты для идентификации возбудителя, инструментальные методы обследования и клиническую диагностику (клинический опыт врача). Естественно, что только по наличию тех или иных антител не может быть поставлен достоверный диагноз заболевания. Необходимо одновременно выявлять антитела к возбудителю методом ИФА и выявлять возбудителя методом ПЦР (полимеразная цепная реакция) или другими методами.

Стоимость анализа ИФА в нашем медцентре

* Исследование в режиме CITO:

Источник