Молекулярная аллергодиагностика что это
Современные возможности лабораторной аллергодиагностики
*Пятилетний импакт фактор РИНЦ за 2020 г.
Читайте в новом номере
Аллергические заболевания являются глобальной эпидемиологической проблемой во всем мире: 10–30% населения планеты имеют какие-либо проявления аллергических заболеваний. В этой связи крайне актуальны их ранняя диагностика и профилактика. Современная аллергодиагностика располагает широким спектром эффективных инструментов, позволяющих максимально персонализировать диагноз и спрогнозировать эффективность проводимого лечения. В развитии аллергических реакций принимают участие в основном иммуноглобулины класса Е (IgE), которые отвечают за проявление аллергии немедленного типа и выявляются при использовании различных диагностических инструментов.
Полисенсибилизация является важной клинической характеристикой, поскольку она затрагивает около 70–80% населения мира, страдающего аллергией; диагностический путь требует использования адекватной и тщательной методологии, основанной на демонстрации соответствия между историей болезни и документированной сенсибилизацией. Ведение пациентов с полисенсибилизацией должно быть основано на тщательном обследовании с использованием возможностей молекулярной аллергодиагностики. Мультиплексные системы, наиболее прорывной метод на сегодня, дает полное представление о профиле сенсибилизации, которая является ключевым аспектом при диагностике аллергических заболеваний.
Ключевые слова: аллергические заболевания, IgE, аллергодиагностика, полисенсибилизация, биочип, компонентная диагностика, молекулярная диагностика, АСИТ.
Для цитирования: Бала А.М., Клещенко А.Б., Чурсинова Ю.В. Современные возможности лабораторной аллергодиагностики. РМЖ. 2019;1(II):56-61.
Current possibilities of an allergy laboratory diagnosis
A.M. Bala, A.B. Kleschenko, Yu.V. Chursinova
Moscow Regional Scientific Research Clinical Institute named after M.F. Vladimirskiy
Allergic diseases are a global epidemiological problem: 10–30% of the planet population has any allergic diseases’ manifestations. In this regard, early diagnosis and prevention of allergic diseases are extremely relevant. Current allergy diagnosis is a wide range of effective tools that allow maximally personalizing the diagnosis and predicting treatment effectiveness. Mainly, IgE are involved in allergic reactions development, as they are responsible for the manifestation of immediate-type allergy and are detected by using various diagnostic tools.
Polysensitization is an important clinical characteristic, as it affects about 70–80% of the world’s allergic population. The diagnostic pathway requires an adequate and detailed methodology based on the compliance demonstration of medical history with documented sensitization. The patient management with polysensitization should rely on a careful examination, mainly, based on the possibilities of allergy molecular diagnostics. Multiplex systems are the most breakthrough method, which gives a complete sensitization profile picture (a key aspect of the allergic diseases’ diagnosis).
Keywords: allergic diseases, IgE, allergy diagnosis, polysensitization, biochip, component diagnosis, molecular diagnostics, ACIT.
For citation: Bala A.M., Kleschenko A.B., Chursinova Yu.V. Current possibilities of an allergy laboratory diagnosis. RMJ. 2019;1(II):56–61.
Статья посвящена современным возможностям лабораторной аллергодиагностики. Рассмотрено применение мультиплексных систем, дающих полное представление о профиле сенсибилизации, которая является ключевым аспектом при диагностике аллергических заболеваний.
Введение
Преимущества и недостатки лабораторных методов аллергодиагностики
Методы диагностики
Молекулярная аллергодиагностика
Заключение
Новые правила предиктивной и персонализированной медицины, которые помогают получить максимальный результат от специфических и высокоперсонализированных методов лечения, в полной мере применимы в аллергологии. Внедрение сложных методик, основанных на использовании аллергокомпонентов, — достойное персонализированной медицины решение для лечения пациентов с аллергией.
Будущее аллергологии принадлежит компонентной диагностике, позволяющей расшифровать профиль сенсибилизации на молекулярном уровне, прогнозировать ургентные аллергические реакции, оценить тяжесть состояния, обусловленную аутоаллергией, определить объективные показания и противопоказания к назначению АСИТ, а также максимально индивидуализировать лечение и используемые рекомендации [1].
Только для зарегистрированных пользователей
Кому нужна молекулярная диагностика
Можно ли есть яйцо при аллергии на яичный белок и почему не помогает АСИТ? О молекулярной диагностике – методе современного анализа на аллергены рассказывает Ольга Гурьевна Елисютина, врач аллерголог-иммунолог, кандидат медицинских наук, ведущий научный сотрудник отделения аллергии и иммунопатологии кожи Института иммунологии ФМБА России.
Три года Александр Николаевич честно проходил курс аллергенспецифической иммунотерапии (АСИТ), но так и не избавился от симптомов поллиноза. В медцентре, где его лечили, не смогли объяснить – почему. Вроде кожные пробы и анализ крови на специфические иммуноглобулины Е (IgE) дали положительный результат… Отправили разбираться в Институт иммунологии.
Там ему предложили провести более точный анализ.
Почему не помогает АСИТ
«Пациенты нас часто спрашивают: аллергия на пыльцу березы диагностирована, а АСИТ не помогает, – рассказывает Ольга Гурьевна. – Почему? Дело в том, что, например, у пыльцы березы не один, а минимум шесть аллергенных компонентов. Они представляют собой охарактеризованные молекулы (то есть строение и функции этих молекул хорошо изучены, а также известно, к какому семейству белков они относятся и какие реакции могут вызывать), которые, как правило, являются белками или гликопротеинами, и именно они определяются специфическими IgE-антителами.
Истинную сенсибилизацию вызывают только определенные аллергенные компоненты. Если эти молекулы связываются со специфическими IgE-антителами более чем у 50% пациентов с аллергией к одному и тому же источнику, их называют мажорными, если менее чем у 10% пациентов – минорными. Главный, или мажорный, аллерген пыльцы березы – Bet v 1 (названия аллергенов образованы от латинских наименований; Bet – это Betula verrucosa, береза повислая, или бородавчатая). А есть еще минорные аллергены, например Bet v 2, Bet v 4 и другие».
Кожные пробы, как и анализы крови на специфические IgE, как правило, проводят с экстрактами аллергенов, и они показывает реакцию на все аллергены березовой пыльцы. Положительный результат таких исследований может означать иммунный ответ как на мажорный Bet v 1, так и на минорные Bet v 2 и Bet v 4.
Точно определить, какой именно компонент вызывает аллергию, помогает молекулярная аллергодиагностика: она определяет уровень специфических иммуноглобулинов Е не к экстрактам аллергенов, а к отдельным их компонентам.
Именно такой анализ провели Александру Николаевичу. Тут-то и выяснилось, почему АСИТ не помогал! Оказывается, у него специфические IgE-антитела вырабатывались не к основному, мажорному аллергену пыльцы березы Bet v 1, а к Bet v 4. Этот компонент является маркером перекрестных реакций между пыльцой деревьев, злаковых и сорных трав. И действительно, после дополнительных исследований у Александра Николаевича обнаружилась истинная сенсибилизация к аллергенам тимофеевки Phl p 1, 2, 4, 5, 7. Лечили его аллергенами пыльцы березы, а надо было аллергенами трав, потому что Bet v 4 обладает перекрестными свойствами с их пыльцой, точнее, с аллергеном Phl p 7.
Как это работает
А молекулярная диагностика может! Проводят ее с помощью определения специфических IgE-антител к отдельным компонентам (в лабораториях доступны лишь немногие из них) или ISAC-теста (ISAC – иммунный твердофазный аллергочип), разработанного учеными Венского медуниверситета. Кровь на анализ можно брать как из вены, так и из пальца, что очень удобно для детей.
«ISAC-тест позволяет определить сразу 112 компонентов из 51 источника аллергенов, – комментирует доктор Елисютина. – Когда мы стали с ним работать, то поняли, что у нас случались ошибочные назначения. Бывало, человек рассказывал, что летом задыхается, мы назначали АСИТ тимофеевкой, но безрезультатно. А молекулярный анализ показал, что пациент сенсибилизирован к тимофеевке за счет минорного Phl p 7 и такая терапия ему вряд ли поможет».
Что еще дает тест
Молекулярная диагностика неоценима при пищевой аллергии. Например, в белке яйца описано минимум пять белковых компонентов: овомукоид (Gal d 1), овальбумин (Gal d 2), кональбумин (Gal d 3), лизоцим (Gal d 4), ливетин (Gal d 5). Какие-то из этих белков термостабильны, то есть не разрушаются при нагревании, какие-то – термолабильны: нагревание снижает их аллергенное действие до нуля.
«Овомукоид – самый страшный компонент белка куриного яйца, он термостабилен, – говорит Ольга Гурьевна. – И если у ребенка сенсибилизация именно к нему, то яйца ему нельзя ни в каком виде. А если малыш сенсибилизирован к овальбуминам, то варившееся 10–20 минут яйцо он может есть. Без молекулярной диагностики мы бы такие рекомендации дать не смогли, а между тем это очень важно, потому что дети должны расти, получать белок из разных источников».
То же касается молока. Сывороточные альбумины в нем разрушаются кипячением, а вот казеин Bos d 8, который вызывает самые тяжелые реакции, термостабилен. Ребенку с аллергией к казеину вообще никакое молоко нельзя: ни коровье, ни козье, ни даже грудное. Только гидролизат (специальное детское питание, где белки расщеплены до аминокислот – отдельных белковых компонентов).
О вреде самолечения
«Не советую заниматься самолечением и самодиагностикой, тратить на это деньги, – предупреждает Ольга Гурьевна. – Пациент должен прийти к врачу-аллергологу, а тот уже разберется, аллергия ли это. Может, это вирусная инфекция или кожный зуд из-за сахарного диабета – мало ли какие могут быть причины всех тех состояний, которые наши пациенты называют аллергией!»
«Часто бывает: краснеет лицо, и сразу мысль – аллергия! – продолжает врач. – А я понимаю, что это чисто кожная проблема: розацеа (хроническое заболевание кожи лица с покраснением и сыпью.– Ред.) или угревая болезнь. Тогда вообще любая аллергодиагностика – пустая трата денег».
«Мы собираем анамнез, проводим кожные пробы, анализ на специфические IgE, и только когда неэффективен АСИТ или мы не можем понять, почему клинические данные не соответствуют лабораторным, назначаем ISAC-тест. К тому же правильно интерпретировать и прокомментировать полученные результаты может только клиницист, который работает с пациентами», – резюмирует доктор Елисютина.
Молекулярная аллергология
Молекулярная аллергология – это новые знания, уточняющие характеристики аллергенов и развитие механизмов аллергических реакций. В основе лежит метод молекулярной диагностики – IMMUNOCAP.
Попробуем понять смысл на простом примере. Существует аллерген пыльцы березы. Это многобелковый аллерген. Из всего спектра белков выявлены два клинически значимых. Мажорный – Bet V1 –термостабиль- ный и минорный – Bet V2 – термолабильный. Исследование количественное. У пациента может быть выявлен Bet V1 и Bet V2 или один из них. О чем это говорит и к чему такие молекулярные подробности?
1. Точность диагностики приводит к более четкой постановке диагноза, выбору лечения и определения диеты.
При возникновении аллергии врач и пациент задаются вопросом – это истинная аллергия или перекрестная. Проще, у разных аллергенов могут быть одинаковые белковые компоненты.
Допустим, у человека аллергическая реакция и на березовую пыльцу, и на орехи, и на продукты из сои. Прежние методы диагностики (кожные пробы и анализ крови) просто подтверждают факт существования аллергии. Молекулярная же диагностика позволит точно указать, какой белок конкретно виноват в развитии аллергии.
Присутствует мажорный аллерген – по таблице перекрестной аллергии нельзя употреблять продукты с перекрестными белками. А при минорном аллергене – можно употреблять продукты термически обработанными, тем самым еда становится более разнообразной и качество жизни улучшается.
2. Молекулярная диагностика позволяет оценить эффективность АСИТ.
Специфическое лечение аллергии – это АСИТ (специфическая иммунотерапия, цель которой выработка защитной реакции организма против конкретного аллергена.) Это открытая возможность жить жизнью здорового человека в сезон пыления или иного контакта с аллергеном. Практически, используя старые методы диагностики, определить успех лечения на старте сложно.
Примерно по этому принципу – мажорный-минорный аллергены можно определять и пищевую аллергию (молоко, яйцо) и отвечать на вопрос – жить ли вам с любимым котом или лучше расстаться.
В медицинском центре применяется индивидуальный, комплексный подход к лечению аллергических заболеваний, внедряются самые современные технологии диагностики.
Диагностика включает в себя консультацию аллерголога-иммунолога, лабораторную диагностику, инструментальную диагностику, а также информационные методы диагностики.
Вся информация носит ознакомительный характер. Если у вас возникли проблемы со здоровьем, то необходима консультация специалиста.
Молекулярная аллергодиагностика
Из этой статьи вы узнаете почему люди с аллергией долгое время не могут избавиться от этого заболевания. И что сделать, чтобы вылечиться.
Вам надоело горстями пить антигистаминные и гормональные препараты, которые незначительно или на короткое время снижают симптомы. Нет результатов от потраченных денег на лабораторные исследования, лекарства и врачей. Вам советуют не кормить ребенка вареными яйцами, не давать молоко или исключить из рациона цитрусовые фрукты. Но болезнь не проходит.
На сегодня разработаны новые подходы в диагностике и лечении заболевания. Фармация выпускает препараты, способные купировать приступы аллергических реакций и убрать симптомы. Но для этого нужна точная диагностика.
«Сейчас в мире отмечается рост заболеваемости аллергическими патологиями до уровня эпидемий. Четвертая часть земного шара страдает от аллергии, и, к сожалению, прогноз неутешителен. Мы ожидаем увеличения частоты болезней, в частности таких, как бронхиальная астма, аллергический ринит, атопический дерматит. И особенно это касается детской популяции» ― из интервью с доктором медицинских наук профессором кафедры клинической аллергологии ФГБОУ ДПО «Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования» Минздрава России Н.М. Ненашевой
Аллергия – гиперреакция иммунной системы организма на воздействие любых веществ, имеющихся в окружающей среде, которые сами по себе в большинстве своем безопасные.
Что происходит в организме?
Аллергены инфекционного (бактерии, грибки, плесень, кишечные паразиты, вирусы) и неинфекционного (пыльца цветов, укусы насекомых, лекарства, пища, домашняя пыль, шерсть, солнце, химические соединения) характера проникают в организм человека через кожу, легкие, желудок, с инъекциями. Иммунная система вырабатывает антитела ― иммуноглобулины (иммуноглобулин IgE), которые защищают организм от всего чужеродного. И это нормально.
Чтобы понять, какой компонент вызывает реакцию, врач собирает анамнез больного, оценивает состояние и назначает лабораторные исследования.
Самые простые и дешёвые лабораторные способы диагностики являются:
Они неудобны в плане отмены антигистаминных и гормональных препаратов за 3-6 дней. И сама процедура неприятная, требует повреждение кожных покровов. Провокационные пробы нужно проводить под наблюдением врача в стационаре. Дети до 2-х лет и люди старше 60 лет могут давать ложноположительные результаты, что затрудняет диагностику. И с перекрестной аллергией сложно поставить диагноз.
Эти исследования имеют противопоказания:
В чем причина?
Все перечисленные пробы проводят с экстрактами аллергенов, которые «всего лишь» только подтверждают факт болезни. Эти экстракты представляют собой неразделенную смесь молекул из белков, пептидов, полисахаридов и т.д. Их определяют специфическими IgE-антителами, которые в свою очередь делятся на минорные и мажорные компоненты*. Какой именно аллерген участвует в реакции при кожных пробах выяснить затруднительно.
А ведь это очень важно! И пациенты лечатся годами, но болезнь не отступит, а только усугубляется.
Все малыши с аллергией на молоко и яйца не получают этих ценных продуктов. И если реакция на овомукоид, который не исчезает при термической обработке, то яйца противопоказаны ребенку. Остальные дети могут есть вареные яйца. С молоком тоже неоднозначно. Если у ребенка реакция на сывороточный альбумин, ему можно пить только кипяченое молоко. Но если реакция к казеину, который не разрушается при кипячении, то малыш не может пить даже материнское молоко. Ему дают только специальные детские смеси.
«Например, очень сложно решить, каким аллергеном следует проводить АСИТ, если у пациента положительные кожные пробы с аллергенами пыльцы деревьев, луговых и сорных трав, клеща домашней пыли, при этом симптомы у него отмечаются круглый год. В таких случаях понять, к чему он на самом деле сенсибилизирован и каким аллергеном мы можем провести АСИТ, позволяет понять компонентная аллергодиагностика» ― из интервью с доктором медицинских наук профессором кафедры клинической аллергологии ФГБОУ ДПО «Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования» Минздрава России Н.М. Ненашевой
Молекулярная аллергодиагностика ― это ключ, который может выяснить причины. Она точно определяет «ту самую» молекулу, на которую, собственно, и реагирует аллергик.
Показания для молекулярной аллергодиагностики:
Этот метод позволяет сделать анализ из капельки крови, которую могут привезти за сотни километров в лабораторию. Это ли не чудо!
Молекулярная аллергодиагностика важна для определения причин, точной и своевременной постановки диагноза, и правильного назначения лечения.
Есть специальные лаборатории, которые выполняют данные тесты. Это платная услуга, зато с очень точными результатами.
* В составе одного аллергена есть большое количество разных молекул. Каждая из них влияет на реакцию организма. Установлено, что мажорные аллергены в молекулах связываются со специфическими IgE-антителами с большей половиной пациентов с аллергией к одному и тому же источнику. А минорные – менее чем у 10% пациентов.
Аппараты молекулярной аллергодиагностики
ImmunoCap ― тест-система швейцарского производства компании Phadia измеряет IgE-антитела на молекулярном уровне на более чем 100 компонентов аллергенов.
Применяют при ингаляционных аллергиях, для ранней диагностики. Но может давать ложные результаты при пищевых аллергенах.
IMMULITE ― тест-система английского производства, способна находить самые незначительные концентрации IgE. Система очень похожа на ImmunoCap по показаниям. Определяет порядка 450 индивидуальных аллергенов.
Аллергочип методом ImmunoCAP ISAC ― самый содержательный тест. Применяют при выявление мажорных и минорных белков, пищевых аллергенах, причинах перекрестных и анафилактических реакций, для результатов терапии АСИТ. Проверяет чувствительность пациента к 112 белкам у 51 аллергена.
ALEX Allergy Explorer ― нанотехнологическая автоматизированная тест-система австрийской компании MADx.
Применяют при пищевой аллергии, анафилактических, перекрестных реакций, для результатов терапии АСИТ, детям с полугода в анамнезе анафилаксия и с 3 лет при постоянных ринитах, воспалениях глаз, выявление мажорных и минорных белков.
ALEX 1 ― тест показывает уровень иммуноглобулина, чувствительность к 125 белкам, 282 аллергенам.
ALEX 2 ― проверяет уровень иммуноглобулина, реакцию на 300 аллергенов, 178 белков.
Преимущество молекулярной аллергодиагностики неоспоримы:
Аллергия — заболевание, которое можно вылечить!
При первых признаках болезни не затягивайте с посещением врача!
Не доводите до хронического заболевания!
Современная молекулярная аллергодиагностика позволяет грамотно подобрать лечение, а значит чувствовать себя здоровым и радоваться жизни.
Будьте здоровы!
Частное предприятие «Гемотест»,
Лицензия № 02040/3986 МЗ РБ
от 27.12.2005 г.
220029 Республика Беларусь, г. Минск,
пр-т Машерова, д. 17/4, каб. 501, 501А-Е
Тел./факс: +375 17 237-45-03,
Тел. моб.: +375 29 270-37-45 (МТС)
Тел. моб.: +375 29 145-45-03 (Velcom)
E-mail: info@gematest.by 
УНН 690323991, БИК MMBNBY22
p/c BY61MMBN30120170300109330000,
в ОАО «Банк Дабрабыт»
Адрес банка: Республика Беларусь, г. Минск,
ул. Коммунистическая, д. 49
· © 2021 Гемотест · Designed by Themes & Co ·
АЛЛЕРГОЧИП ISAC (112 аллергокомпонентов из 51 источника аллергенов) (ImmunoCAP) в Масы
Приём и исследование биоматериала
Когда нужно сдавать анализ АЛЛЕРГОЧИП ISAC (112 аллергокомпонентов из 51 источника аллергенов) (ImmunoCAP)?
Подробное описание исследования
Комплексное исследование позволяет выявить наличие гиперреактивности на 112 аллергокомпонентов из 51 источника. Используется для диагностики аллергологических заболеваний и выбора препарата для АСИТ — аллергенспецифической иммунотерапии.
Молекулярная аллергодиагностика позволяет получить информацию о характере сенсибилизации к отдельным белкам и прогнозировать клинические проявления. Аллергочип – ISAC — это платформа для иммунологического анализа, которая позволяет измерять специфические IgE. Для проведения исследования достаточно всего 30 мл крови.
Возможности молекулярной диагностики включают:
В методике используются очищенные натуральные и рекомбинантные аллергенные молекулы, что позволяет:
Аллергочип ISAC позволяет выявить гиперреактивность к 112 аллергокомпонентам из 51 аллергена. Используется для диагностики сложных случаев перекрёстной сенсибилизации.
Многие природные источники содержат перекрестно-реагирующие аллергокомпоненты высокой активности. Сенсибилизация из-за воздействия таких компонентов определяется положительным результатам анализа одновременно на несколько аллергенов. Что создает сложность для постановки диагноза и обнаружения источника аллергии при использовании стандартных методов исследования.
При создании ImmunoCAP применялись сверхточные нанотехнологии. В исследовании используются высокоочищенные природные или рекомбинантные аллергокомпоненты, иммобилизованные на твердой фазе (биочип). Тест позволяет определить основной аллерген и обнаружить причину перекрестных реакций.