На что берется гистология

Гистологический анализ

Гистологическое исследование – это исследование ткани (или образца тканей) под оптическим микроскопом, позволяющее определить тип новообразования и его характеристики. Анализ на гистологию является непреложной основой дифференцирования онкологических заболеваний от неонкологических, без него невозможна постановка онкологического диагноза.

Процедура гистологического анализа

Сроки гистологического исследования

В среднем по России минимальные сроки гистологического исследования составляют от двух недель. Такие сроки исследования часто приводят к длительному ожиданию пациентом результатов, а значит, и упущенному времени при необходимости своевременного адекватного лечения. При обращении в ЮНИМ сделать гистологию можно от 3 дней с момента доставки препаратов в лабораторию. Результаты пациент или лечащий врач смогут получить в день готовности заключения по электронной почте, а оригинал заключения, стекла и блоки будут доставлены позже экспресс-почтой.

Доставка материалов на гистологический анализ

Организация и оплата доставки сырого материала (биоптатов в формалине) осуществляется клиентом.

Стоимость и срок исследования

* Организация и оплата доставки сырого материала (не в блоках) осуществляется клиентом.

По всем возникшим вопросам Вы можете проконсультироваться у нашего медицинского администратора по телефону: 8-800-555-92-67 или написать нам в WhatsApp: +7 925 740 05 87

Источник

Как проводится гистологическое исследование: виды, методы, особенности

Злокачественные новообразования — это группа заболеваний, насчитывающая несколько тысяч видов опухолей разных типов и разной степени злокачественности. Они подразделяются на большие группы в зависимости от того из каких тканей они развиваются: если из эпителиальных (барьерных) — то это раки, если из соединительных тканей (мягких тканей и костей) – саркомы, если из лимфоидных (иммунных) – лимфомы/лейкозы. От того насколько правильно верифицирована опухоль (определен ее тип, степень злокачественности и другие характеристики) зависит правильность и эффективность лечения. Важную роль в этом играют гистологические исследования.

О том, как проходят гистологические исследования, какие задачи кроме диагностических они позволяют решать, что влияет на сроки их выполнения рассказывает заведующая патологоанатомическим отделением с прозектурой НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова, к.м.н. Анна Сергеевна Артемьева.

Что служит материалом для патоморфологических (гистологических) исследований?

Процесс получения фрагмента ткани (биоптата) — биопсия – это несколько разных способов забора материала для гистологического исследования.

Биопсию внутренних органов делают под УЗИ-навигацией, либо с помощью хирургического вмешательства.

Как обрабатывают эти материалы для проведения гистологического исследования?

1 Этап. Фиксация — «консервирование» биоптата в формалине — специальном химическом растворе, который предотвращает гниение, позволяет сохранить структуры ткани.

Фиксация биоптата может занимать от 6 до 24 часов – в зависимости от его вида и размера.

Операционный материал фиксируется дольше, в несколько этапов. Сначала предварительная фиксация, которая занимает примерно 12 часов. Затем вырезка нужных фрагментов и повторная фиксация еще 24 часа.

Соотношение объема материала к объему формалина должно быть 1:20.

2 Этап. Процессинг — процесс обезвоживания, обезжиривания и пропитки материала парафином. Автомат перемещает кусочек материала из раствора в раствор.

В качестве растворов применяются: абсолютированный изопропиловый спирт (6-8 смен), ксилол (2 смены), расплавленный парафин (2 смены).

Программа разнится для «жирного» материала (к которым относятся, например, ткани молочной железы) и «нежирного» – 36 и 24 часа соответственно.

Процесс получения парафиновых блоков.

3 Этап. Изготовление парафинового блока. Кусок материала помещается в форму с расплавленным парафином (уже другим нежели во время процессинга – с более высокой температурой плавления) и охлаждается. Выполняется вручную, сложно ускорить.

4 Этап. Изготовление срезов. Толщина образца — кусочка ткани, залитого в парафин – 1-3 мм. Толщина каждого среза 4-5 мкм (0,004-0,005 мм). Выполняет лаборант с использованием специального инструмента – микротома.

Срезы монтируются на стекла и должны высохнуть.

Несмотря на то, что часть материала теряется при выравнивании в микротоме, при должном профессионализме, из одного образца — материала от одной биопсии, операционного материала от одной опухоли, возможно изготовить около 100 стекол (микропрепаратов).

Для чего делаются срезы?

Срезы делаются для рутинной окраски гематоксилинном и эозином, иммуногистохимического исследования и других видов исследований.

Срезы для всех исследований используются одинаковые, различается окраска, могут отличаться стекла, на которые они монтируются, так для ИГХ и FISH нужны специальные адгезивные стекла или заряженные стекла.

Блоки и стекла способны храниться долгие годы и использоваться для проведения дополнительных гистологических исследований, пересмотров, а также в научных целях.

Архив гистологических материалов собирается в НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова с 1927 года и содержит более 10 млн единиц хранения (микропрепараты — стекла, парафиновые блоки, архивные карточки, влажный архив).

Какие виды гистологических исследований наиболее информативны?

Что позволяют определить разные виды гистологических исследований

Гистологическое исследование – что это такое?

Позволяет верифицировать опухоль – то есть определить из каких клеток она состоит (из какой ткани она развивается), степень ее дифференцировки (зрелости).

Рутинная окраска, выполняющаяся при гистологическом исследовании, позволяет выявить патологический процесс в анализируемом материале (биоптате, операционном материале):

Также, в большинстве случаев, благодаря рутинной окраске, можно определить степень злокачественности опухоли и, если она достаточно зрелая, то какова ее природа.

Окрашенные срезы под микроскопом

Инвазивный протоковый рак er 100%.

Карцинома сигмовидной кишки.

Крупноклеточная нейроэндокринная опухоль.

МТС крупноклеточной нейроэндокринной опухоли.

Неспецифический рак молочной железы. Участок in situ карциномы внутри протока, криброзного типа.

Низкодифферинцированный рак пищевода.

При гистологическом исследовании биоптата и операционного материала можно оценить распространенность: размер опухоли и прорастание в окружающие ткани, насколько затронуты лимфоузлы и есть ли метастазы в отдаленные органы (если эти все структуры присланы для гистологического исследования). При консультации готовых микропрепаратов – стекол, это, как правило, невозможно, если опухоль больше размеров гистологической кассеты или рассечена предыдущим исследователем и не предоставлены данные макроскопического исследования.

Во время гистологического исследования изучаются все стекла от одного образца – материала, полученного от одного вмешательства — одной операции или одной биопсии, вне зависимости от их количества, это считается одной консультацией.

Сроки выполнения гистологического исследования зависят от количества микропрепаратов и от категории сложности того процесса, который в них обнаруживается, сроки могут удлиняться, особенно при необходимости использования дополнительных методов исследования и анализа дополнительных сведений. На сроки выполнения гистологического исследования влияет полнота предоставленной пациентом клинической информации, в том числе данных уже проведенных исследований.

Иммуногистохимия (ИГХ)

Сложное многоэтапное исследование, выполняется после гистологического исследования на том же материале. Опухолевые срезы окрашиваются антителами, которые способны связываться антигенами (белками), которые несут опухолевые клетки. Разные опухолевые клетки несут разные антигены, к каждому из которых подобно ключа к замку подходит антитело.

Один из этапов ИГХ

ИГХ исследование — это комбинаторика. 100% специфичных и чувствительных к какой-то опухоли маркеров не существует, но есть набор антигенов, которые в определенном типе опухоль должны быть и набор тех, которых там быть не должно, таким образом ИГХ-панель строится так чтобы включать несколько антител, которые должны быть позитивны и несколько, которые должны быть негативны. Для разных опухолей различаются эти наборы позитивных/негативных маркеров.

При проведении прогностической ИГХ – выявлении маркеров чувствительности к терапии определяется набор таких маркеров для конкретных опухолей, например, рака молочной железы: рецепторы стероидных гормонов (эстроген, прогестерон), рецептор эпидермального фактора роста (HER2) и индекс пролиферативной активности Ki67 (скорости деления клеток).

Стекла окрашиваются последовательно — различными антителами красятся наборы маркеров в несколько этапов, процесс окраски стекол одним антителом занимает 48 часов.

Таким образом, каждое антитело наносится на отдельный срез ткани, монтированный на отдельное стекло, как правило с соответствующим внешним контролем, количество реакций (используемых антител) и этапов окраски может существенно варьировать в зависимости от конкретной диагностической ситуации, все зависит от индивидуальных особенностей опухоли. Проводится такое количество окрасок, которое необходимо для того, чтобы выявить наиболее характерный для определенной опухоли набор позитивных и негативных маркеров.

Кому-то для этого будет достаточно 5 антител, а кому-то необходимо сделать 20 окрасок и более. Максимальное количество окрасок, которое нам приходилось делать – 212.

Поэтому точные сроки и стоимость этого исследования невозможно определить заранее. Разные по течению и прогнозу опухоли могут быть очень похожи друг на друга, только минимальные различия в окрашивании, с учетом клинических данных и данных других методов обследования, могут позволить установить верный диагноз.

Есть целый ряд доброкачественных опухолей, симулирующих злокачественные, в том числе высокоагрессивные, а некоторые злокачественные высоко дифференцированные опухоли трудно отличить от воспалительных и реактивных процессов. В таких ситуациях только опыт и квалификация патоморфолога, анализ всего комплекса доступной информации (снимки КТ, МРТ, рентген, протокол операции, и др.) позволяют поставить диагноз.

В грамотной интерпретации результатов ИГХ очень важна роль эксперта, ведь те случаи, с которыми приходится работать, в большинстве своем, сложные. Практически не существует антител, которые могут выступать в качестве 100%-х маркеров той или иной опухоли, врачу всегда приходится взвешивать различные вероятности.

Что определяется с помощью ИГХ?

Иммуногистохимия позволяет оценить потенциальный темп роста опухоли, ответ на химио-, таргетную, гормональную терапию.

Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH-тест)

Это метод молекулярно-генетической диагностики в ткани.

FISH проводится в срезе ткани и позволяет привязать генетическую перестройку к конкретной опухолевой клетке.

В этом тесте также используются специальные красители, которые связываются только с определенными участками хромосом. Их называют зондами, которые могут быть помечены флуоресцентным или хромогенным красителем, визуализирующимися при помощи флуоресцентного или светового микроскопа.

Технические операции по подготовке гистологических стекол к этому исследованию занимает 2 рабочих дня.

Анализ препарата с помощью многоголового микроскопа.

Полученные микропрепараты очень чувствительны к внешней среде – они могут выцвести со временем, чтобы избежать потерь информации все FISH-препараты сканируются, создается их цифровая копия, которая доступна для внешнего пересмотра. Специалисты просматривают флуоресцирующий материал в темном поле, в анализе препарата принимают участие как минимум 2 специалиста. При необходимости используется и цифровой анализ.

Что определяется с помощью FISH-теста?

FISH-тест позволят диагностировать некоторые виды опухолей, определяет целесообразность использования некоторых химиотерапевтических препаратов.

Проведение гистологического исследования, и в первую очередь FISH-теста — это экспертная работа, которая зависит от квалификации специалиста. Очень многие мутации, которые выявляются в опухолях, не всегда являются метками опухолей, они могут находиться и в доброкачественных образованиях или нормальных тканях.

За год патологоанатомическое отделение НМИЦ онкологии имени Н.Н. Петрова выполняет около 20000 гистологических исследований (пациентов), из них около 5000 консультативных случаев (пересмотров), более 30000 ИГХ исследований, а также участвует в программе внешнего контроля качества ИГХ исследований NordIQ.

Специалисты отделения обладают огромным опытом проведения гистологических исследований и экспертными компетенциями.

Скорость выполнения гистологических исследований и адекватность гистологического заключения зависят от ряда факторов:

После выполнения гистологического исследования пациент получает гистологическое заключение/протокол исследования гистологического материала.

Расшифровка гистологического исследования: на что обратить внимание?

Гистологическое заключение включает в себя несколько рубрик (полей):

Макроскопическое описание

Заполняется как для биоптатов — не обязательно, так и для операционного материала, для которого имеет крайне важное значение в ряде случаев.

Микроскопическое описание

Описание изменений на микроскопическом уровне, не обязательно к заполнению, так как вся необходимая информация может быть отражена в поле «заключение».

Результаты иммуногистохимического исследования

В этом поле описано какие антитела использовались в данном случае и каков результат окрашивания: наличие окрашивание или его отсутствие, локализация в клетке при необходимости, а также процент позитивных клеток и интенсивность реакции, когда это имеет значение.

Патологоанатомическое заключение

Содержит нозологическую/классификационную единицу, если ее возможно установить по исследованному материалу, то есть дает ответы на вопросы:

Также приводятся все необходимые прогностические данные: степень дифференцировки, параметры, влияющие на стадию, состояние краев резекции, если возможно их оценить и т.п.

Дополнительные замечания и рекомендации

Поле может содержать комментарии, относительно возможного направления дальнейшего обследования, вероятности того или иного диагноза, необходимости ознакомиться с теми или иными клиническими данными и др.

Мы не рекомендуем пациентам самостоятельно заниматься расшифровкой показателей гистологического исследования, используя информацию, полученную на различных Интернет-сайтах и форумах пациентов, так как на интерпретацию данных влияет большое количество факторов, в том числе, возраст пациента, данные других исследований и др.

Расшифровкой исследования может заниматься только специалист – врач онколог по профилю заболевания!

Авторская публикация:
АРТЕМЬЕВА АННА СЕРГЕЕВНА
заведующий патологоанатомического отделения с прозектурой ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, кандидат медицинских наук

Источник

Гистологические исследования

Гистологические исследования

Гистологические исследования

Гистология — метод исследования тканей организма. При необходимости врач производит взятия образца ткани какого-либо органа для подробного его изучения под микроскопом. Очень часто гистологические исследования применяются в области гинекологии и онкологии.

Чтобы получить образцы тканей, используют несколько основных методов забора материала:

— Выскабливание с помощью кюретки (кюретаж) внутренних стенок половых органов (матки или шейки матки).
— Пункция длинной иглой, производящей забор тканей и одновременно жидкости из новообразований в матке. Используется при диагностировании не доброкачественных опухолей.
— Щипцовая биопсия – распространенный гинекологический метод взятия образца на исследование. Отщипывание материала производится несколько раз, чтобы отобрать большее количество тканей и наверняка захватить мелкие образования вроде полипов.
— Эксцизионная биопсия проводится иссечением необходимого для анализа количества тканей путем проведения операции.
— Аспирация или аспирационная биопсия заключается в отсасывании из матки специального раствора, введенного заранее в ее полость. Электроприбор для аспирации помогает получать смывы со всего эндометрия. Метод применяется при определении эндометрита.
— Пайпель-биопсия заключается в введении пластиковой трубочки с отверстием в полость матки, в это отверстие попадает образец ткани для исследования. Способ безболезненный, простой и наиболее часто применяемый в гинекологии.
—Отрезание тканей с части удаленного органа проводится в случае гистерэктомии.

Правильно выбранный способ изъятия материала для анализа и его объем влияют на получение правильного результата. Поэтому очень важно для врача выбрать подходящий в каждом конкретном случае метод сбора образцов.Гистология – сложное исследование, оно обязательно проводится врачом-патоморфологом, который является специалистом в области изучения тканей человеческого организма.

Что такое гистология в гинекологии

Очень важным и самым информативным типом исследования в гинекологии считается анализ на гистологию. Женское здоровье в целом зависит от функционирования половых органов, поэтому предупреждение различных заболеваний или их лечение уже на ранних стадиях могут существенно повысить уровень жизни пациентки.

При помощи гистологии стало возможным выяснение причин бесплодия или невынашивания беременностей у женщин, имеющих подобные проблемы. Многие гинекологические диагнозы можно поставить только после проведения данного обследования.

Гистологическое исследование эндометрия

Изучение внутренних слоев ткани шейки матки и самой матки, называемого эндометрий, позволяет проконтролировать работу яичников, диагностировать какие-либо патологии и болезни на начальных этапах, выявить гиперплазию эндометрия.

Чтобы собрать материалы для лабораторного исследования проводят, соскоб с внутренних стенок матки. При непрекращающемся кровотечении не дожидаются времени наступления плановых месячных, забор тканей проводят незамедлительно.

На окрашенных срезах можно определить особенности эндометрия и его строения. Здоровые неизмененные железы имеют отличие от больных по форме, она у них пиловидная, светло окрашенной цитоплазмой. А внутри них обязательно должен присутствовать секрет.

Гистология шейки матки

Гистологию тканей, отобранных с шейки матки, проводят, если есть опасения возникновения предраковых, предопухолевых состояний или наличие воспаления в этом органе. На анализ отбирается небольшая частица материала с поверхности шейки, забор выполняется без ее раскрытия.

Сбор материала для обследования проводится одновременно при проведении гистероскопии в диагностических целях. Это вмешательство представляет собой обследование внутренних тканей и поверхности матки с применением специально предназначенного для такой процедуры оптического прибора, называемого гистероскоп.

Врач отбирает кусочек ткани под наркозом (как правило, общим, но иногда применяют только обезболивание). Отобранные ткани направляют на гистологическое исследование, которое поможет определить причину нарушений в работе детородного органа и отличить злокачественную опухоль от доброкачественной (например, миомы).

Гистология яичников

Гистология яичников выполняется путем введения через брюшную стенку пункционной иглы. Она проникает в сами яичники и отбирает материал для анализа непосредственно из сомнительных участков (кистозного или опухолевого характера). Процесс сбора тканей проводится под контролем аппарата УЗИ, это позволяет провести сбор тканей именно с участков, вызывающих подозрения.

Гистология после замершей беременности

В данном случае на исследование отправляются ткани, полученные от погибшего эмбриона. Начиная со 2 триместра, погибший плод приходится удалять, проводя выскабливание внутренней полости матки.

Анализ на гистологию помогает определить причины замершей беременности, чтобы предотвратить повторения ситуации. Таким образом, можно определить, что стало причиной гибели эмбриона – вирусы или инфекции, особенно половые, диабет или гормональный дисбаланс у женщины, аномальное строение половых органов.

Гистология после выскабливания

Выскабливание матки и ее полости – это сложный процесс сбора эндометрия, поэтому он проводится в операционной под наркозом или анестезией. Процедура занимает около получаса.

При выскабливании сбор материала производится кюреткой. Весь полученный биологический материал собирают в пробирку и отправляют в лабораторию. Показаниями к проведению данной процедуры являются проблемы с беременностью (невынашивание, бесплодие), гиперплазия эндометрия. Также материал может быть собран при удалении плаценты, оставшейся после родов.

После выскабливания исследуют образцы ткани, полученные непосредственно из самой матки. Для этого удаляют часть эпителия и отбирают биологически материал после его удаления из матки.

Почему важен анализ на гистологию

Врачи-репродуктологи широко используют данное исследование для выявления причин и лечения бесплодия. Гистологическое исследование является обязательным при обследовании женщины по причине бесплодия, согласно приказу №107-н МЗ РФ (исследование образцов шейки матки, при необходимости гистероскопия).

Анализ на гистологию, проводимый после выкидыша или при других проблемах с беременностью, покажет причины, вызывающие данные проблемы.

Назначать проведение гистологического анализа необходимо в случаях, когда нужно подтвердить или опровергнуть наличие в организме раковых клеток. Исследование покажет их присутствие даже на самых ранних стадиях заболевания, которые протекают бессимптомно. Это поможет начать лечение своевременно и полностью выздороветь.

Иммуногистохимическое иссле́дование (ИГХ)

Цели ИГХ исследования

Иммуногистохимические исследования позволяют:

— осуществлять гистогенетическую диагностику опухолей

— определять нозологический вариант новообразования;

— выявлять первичную опухоль по метастазу с неизвестным первичным очагом;

— определять прогноз опухолевого заболевания;

— определять злокачественную трансформацию клеток;

— определять возможности таргетной терапии;

— выявлять как резистентность, так и чувствительность опухолевых клеток к химиотерапевтическим препаратам;

— определять чувствительность опухолевых клеток к лучевой терапии.

Это анализ, который может быть назначен лечащим гинекологом в случае, если:

— поставлен диагноз или подозрение на «бесплодие»
— происходит невынашивание беременности (ранняя потеря беременности)
— несколько попыток ЭКО оказались неудачными
— необходима диагностика хронического эндометрита

ИГХ – анализ, который помогает определить наличие и количество клеток, препятствующих возникновению беременности. А также определяет чувствительность рецепторов эндометрия к гормональной стимуляции, т.к. может сложиться ситуация, что женщина в целом здорова и все показатели в норме, однако, эндометрий не воспринимает гормоны, что не позволяет ему развиваться правильно. В этом случае, могут быть обнаружены такие патологические изменения эндометрия, как:

— гиперплазия
— эндометрит
— десинхронизация процессов дифференцировки эндометрия
— неполноценная секреторная трансформация

Зачастую (в 2 из 3 случаях не возникновения желанной беременности) именно эти патологии становятся главными причинами, поэтому так важно вовремя обратиться к опытному специалисту и провести ИГХ.

С помощью иммуногистохимического исследования эндометрия можно выявить инфицирование вирусами (ВПЧ 16, ВПГ и др.), чему в последнее время уделяется большое внимание, как причине хронического эндометрита и, как следствие, бесплодности женщины.

Понимание причины неудачных попыток забеременеть поможет подобрать необходимое лечение и дать возможность получить желанную беременность!

комплексное исследование биоптата шейки матки (морфологическое описание и оценка экспрессии белка р16INK4a) для уточнения биологического потенциала изменений эпителия шейки матки.

Источник