Не более днк lactobacillus spp что значит

Lactobacillus spp. (качественный метод)

Описание исследования

Lactobacillus spp. (лактобактерии) — род грамположительных анаэробных не образующих споры молочнокислых бактерий, жизнедеятельность которых не может осуществляться вне бактериоценоза здорового человека.

Количество известных на сегодняшний день видов лактобактерий превысило 150. Различные биотопы (области организма, отличающиеся относительно однородными факторами среды) могут быть обиталищем 15-20 их разновидностей. Нормальная флора женщины, способной зачинать и рожать детей, содержит порядка 5-6 видов лактобактерий. В здоровом организме именно они являются основой микробиоценоза (т.е. совокупности разных видов бактерий, обитающих в одном биотопе).

Колебание абсолютного количества лактобактерий имеет довольно широкую амплитуду и, по результатам различных исследований, может составлять 90 – 99,9% микрофлоры влагалища. Участие этих микроорганизмов в жизнедеятельности организма многообразно. В частности они:

Дисбиоз влагалища считается выраженным при процентном содержании лактобактерий ниже 20 % относительно всех выделенных микроорганизмов или при полном их отсутствии. Низкий уровень лактобактерий не обязательно указывает на наличие патологии, вызываемой нарушениями баланса микрофлоры. Однако такое состояние может быть предупреждающим сигналом о высокой вероятности развития заболевания. Для постановки диагноза «дисбиоз» в этом случае необходимо наличие подтверждающих данных: клинических проявлений заболевания и (или) присутствия диагностически значимого количества условно-патогенных микроорганизмов.

Для качественного определения специфических фрагментов ДНК Lactobacillus spp. в соскобе клеток эпителия влагалища и цервикального канала применяется метод полимеразной цепной реакции с наблюдением за процессом в режиме «онлайн».

Аналитические показатели анализа:

Подготовка к исследованию

Соскоб (цервикальный канал, влагалище)

Соскобы у женщин отбираются не ранее пятого дня от начала менструального цикла и не позже пятого дня до предполагаемой даты следующей менструации. Если наблюдаются явные признаки заболевания, отбор пробы проводится непосредственно в день обращения.

Требования по подготовке к тестированию:

Проба не отбирается:

Показания к исследованию

Интерпретация исследования

Поскольку тест является качественным, то ответ имеет одну из формулировок: «обнаружено» или «не обнаружено».

Референсные значения: «обнаружено».

Получение результата «не обнаружено» свидетельствует:

Результат анализа выдается на бланке лаборатории медицинской компании «Наука». Пример результата по данному анализу представлен ниже:

Ф.И.О.: Иванова Ирина Ивановна Пол: ж Год рождения: 01.01.0000

Дата исследования: 12.12.0000

Источник

Что нужно знать о бактериальном вагинозе

Многие женщины сталкиваются с симптомами влагалищного дисбиоза. Обильные выделения, молочно-серого цвета и с неприятным запахом часто путают с «молочницей» и проводят «соответствующее» самолечение.

В большинстве случаев, такая стратегия быстрее навредит, чем поможет, поскольку причиной может быть бактериальный вагиноз (БВ).

Что такое баквагиноз

Согласно официальному определению, это невоспалительное заболевание влагалища, характеризующееся резким снижением или полным отсутствием лактофлоры и её заменой на анаэробные бактерии, среди которых наиболее распространены Gardnerella vaginalis (гарднерелла) и Atopobium vaginae (атопобиум).

У здоровых женщин репродуктивного возраста влагалищный микробиом на 95% представлен лактобактериями. Их способность к кислотообразованию (молочная кислота) и продукции перекиси водорода способствует поддержанию кислого pH и подавлению роста остальных микроорганизмов.

Оставшиеся 5% микрофлоры занимают более 300 видов аэробных и анаэробных микроорганизмов, среди которых:

Факторы риска и симптомы

Колонизация влагалища микрофлорой, связанной с баквагинозом, особенно Gardnerella vaginalis и Atopobium vaginae, сопровождается:

Отека и покраснения обычно не наблюдается, что является отличительным признаком от банального вагинита и кандидоза влагалища («молочницы»).

Диагностика

Самым простым, но косвенным, признаком нарушения влагалищной микрофлоры служит повышение pH >4,5. Для проведения такого «анализа» требуются всего лишь тест-полоски для измерения рН, доступные к покупке в любой аптеке. Однако, чтобы выявить возбудителя и начать адекватную терапию такой диагностики, конечно, недостаточно.

Современным и высокоточным методом диагностики влагалищных дисбиозов служит комплексное исследование «Флороценоз».

Этот тест разработан научными специалистами совместно с практикующими клиницистами. И предназначен для определения состава и соотношения нормальной и условно-патогенной флоры влагалища методом ПЦР.

Исследование представлено в 3-х вариантах для различных клинических ситуаций:

Название теста «говорит само за себя», а в результате будет отражено количество:

2. В случае, когда есть подозрения на нарушения более «широкого спектра», к применению рекомендован «Флороценоз», включающий подсчет:

3. При необходимости в дополнительной диагностике ИППП – подходит «Флороценоз – комплексное исследование», включающий в себя подсчет «классического состава» бактерий + выявление ДНК «виновников» ИППП:

Готовность анализов составляет 4-5 дней, а результат можно получить по электронной почте, в личном кабинете на сайте или в любом удобном отделении KDL.

Источник

Что нужно знать о бактериальном вагинозе

В статье представлены современные данные о бактериальном вагинозе — основной причине различных инфекционно-воспалительных осложнений в акушерской и гинекологической практике. Отражены вопросы клинической симптоматики, диагностики и лечения. К наиболее перспективным отнесена вакцинация женщин (вакцина Солкотриховак) в виде монотерапии или в сочетании с индукторами интерферона.

Бактериальный вагиноз (БВ) — это полимикробный невоспалительный вагинальный синдром, возникающий из-за резкого дисбаланса микрофлоры влагалища, вызванного замещением доминирующих микроорганизмов рода Lactobacillus ассоциацией различных бактерий. К настоящему времени достаточно хорошо изучен характер нарушений микрофлоры влагалища при бактериальном вагинозе и спектр микроорганизмов, участвующих в развитии этого заболевания. Очень важно представлять, что бактериальный вагиноз — это изменения не только в качественном, но и в количественном соотношении вагинальной микрофлоры, которая характеризуется резким снижением или отсутствием лактобактерий, продуцирующих Н₂О₂ с одновременным увеличением колонизации Gardnerella vaginalis, грамотрицательных анаэробных бактерий — Mobiluncus spp., Prevotella spp., Bacteroides spp., Fusobacterium spp., Peptostreptococcus spp., а также Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum, появлением грибов рода Candida в невысоком титре.

Степень обсемененности вагинального отделяемого различными видами микроорганизмов здоровых женщин репродуктивного возраста и женщин с бактериальным вагинозом

Микроаэрофильные бактерии:

Облигатно-анаэробные грамположительные бактерии:

Облигатно-анаэробные грамотрицательные бактерии:

Факультативно-анаэробные грамположительные бактерии:

M.hominis

U.urealyticum

M.fermentas

Способность лактобактерий образовывать молочную кислоту в процессе деструкции гликогена определяет рН влагалищного содержимого в пределах 3,8-4,5 и препятствует размножению ацидофильных бактерий. Помимо защитной, влагалищная микрофлора выполняет ферментативную, витаминообразующую, иммуностимулирующую функции, в связи с чем ее рассматривают как индикатор состояния влагалища.

Воздействие на организм женщины разнообразных внешних или внутренних факторов приводит не только к снижению колонизационной резистентности во влагалище и появлению транзиторной микрофлоры, но и активному внедрению условно-патогенных микроорганизмов в слизистую влагалища, мочевых путей, цервикальный канал и верхние отделы половой системы. Это происходит особенно легко на фоне угнетения функции лейкоцитов, развивающейся под влиянием специфических катаболитов, которые вырабатываются анаэробными бактериями, Gardnerella vaginalis, Mobiluncus, Atopobium vaginae и другими.

К наиболее значимым факторам, способствующим формированию бактериального вагиноза, относятся инфекции, передаваемые половым путем. Хроническая хламидийная, трихомонадная инфекция, а также гонорея могут иметь «маску» в форме упорного бактериального вагиноза, что требует дополнительных, специальных методов обследования женщин. Вместе с тем, дисбиоз влагалища развивается и у женщин, использующих различные контрацептивы (гормональные, ВМС или спермициды), имеющих пороки развития влагалища и матки, анатомические деформации наружных половых органов после родов. Зияющий вход во влагалище с опущением стенок — важное условие для нарушения микробиоты и колонизации кишечной микрофлорой. Большое значение имеют эндокринные (гипотиреоз, сахарный диабет), гинекологические и экстрагенитальные заболевания женщин, а также частые ангины, ОРЗ и патология желудочно-кишечного тракта. Вероятно, эта соматическая патология приводит к иммунным сдвигам, отражением которых является дисбиоз влагалищной микрофлоры. Большое значение имеет нарушение местного иммунитета. С бактериальным вагинозом ассоциированы микоплазмы и уреаплазмы, которые способны расщеплять секреторный иммуноглобулин А — один из основных «защитников» слизистой. Угнетение функциональной активности лейкоцитов, вызванное анаэробной флорой, снижение уровня лизоцима, лизина, опсонинов — типичные нарушения местного иммунитета при бактериальном вагинозе.

Бактериальный вагиноз — заболевание, настигающее женщину в любом возрасте — от детства до менопаузы. Клинически в типичных ситуациях оно характеризуется обильными белями с неприятным запахом (особенно после полового акта или менструации). При длительном течении бели липкие, желтовато-зеленоватого цвета или пенистые. Нередко основной жалобой является зуд, жжение во влагалище, болезненность при половом акте, дизурические расстройства. В 25% случаев симптомы практически не выражены. Это бессимптомное течение бактериального вагиноза, но оно не снимает возможности развития осложнений — уретрита, цервицита, эндометрита и сальпингоофорта, а во время беременности — истмико-цервикальной недостаточности, угрозы прерывания, хорионамнионита.

По тяжести клинических проявлений выделяют три степени бактериального вагиноза (Мавзютов Р. А. и соавт.):

1 степень — компенсированный, для которого характерно полное отсутствие в исследуемом материале микрофлоры при неизмененных эпителиоцитах. Указанное состояние слизистой влагалища не рассматривается в качестве патологического, но отсутствие лактобактериальной флоры свидетельствует о принципиальной возможности заселения пустующей экологической ниши попадающими с наружных половых органов микроорганизмами и последующим формированием БВ. Описанные формы могут наблюдаться при микроскопии в результате «чрезмерной» подготовки пациентки к посещению врача или же после проведения интенсивной химиотерапии антибактериальными препаратами широкого спектра действия.

2 степень — субкомпенсированный, характеризующийся количественным снижением лактобактерий, соизмеримым с возрастанием количества сопутствующей грамвариабельной полиморфной бактериальной флоры, и появлением в поле зрения единичных (1-5) «ключевых» клеток при относительно умеренном лейкоцитозе (15-25 в поле зрения). «Ключевые» клетки могут быть представлены как покрытыми бактериальной флорой снаружи эпителиоцитами, так и содержащими бактерии внутриклеточно ввиду неспецифического осуществления эпителиальными клетками функций фагоцитоза.

3 степень — декомпенсированный, являющийся клинически выраженным в соответствии с симптоматикой БВ и микроскопически характеризующийся полным отсутствием лактобактерий, когда все поле зрения заполнено «ключевыми» клетками. Бактериальная флора при этом может быть представлена самыми различными, за отсутствием лактобактерий, микроорганизмами как в монокультуре, так и в различных морфо- и видовых сочетаниях.

В диагностике бактериального вагиноза основными являются критерии R. Amsel. Они включают:

Кроме того, большое значение имеет оценка соотношения количества лейкоцитов и эпителиальных клеток во влагалищном мазке. Характерно преобладание эпителиальных клеток, число которых в 2-3 раза больше, чем лейкоцитов.

Формирование «ключевых» клеток происходит в случае увеличения колонизации G.vaginalis и Mobiluncus spp. с последующей их адгезией на клетки вагинального плоского эпителия. «Ключевые» клетки представляют собой отторгшиеся от эпителиальной выстилки интактные или литически измененные клетки, покрытые бактериями в виде облака или вуали с концентрацией по периферии. В наиболее тяжелых клинически выраженных случаях бактерии заполняют и межклеточное пространство.

Наиболее достоверным методом диагностики является микроскопия вагинальных мазков, окрашенных по методу Грама, когда «ключевые» клетки легко дифференцировать с «ложноключевыми». Чувствительность микроскопического метода составляет 93%, специфичность — 70%. Микроскопический метод позволяет оценить морфологические особенности, соотношение отдельных компонентов вагинальной микрофлоры, получить информацию о состоянии слизистой влагалища и степени лейкоцитарной реакции. Количественный критерий обнаружения «ключевых» клеток остается дискуссионным. Общепризнанный факт превалирования в норме бактерий рода Lactobacillus позволяет использовать его в качестве основного критерия нормы или патологии при исследовании влагалищной жидкости. В пользу указанного свидетельствует невозможность чрезмерного развития сопутствующей флоры, а следовательно, и наличие «ключевых» клеток при сохраненном количественном уровне лактобактерий.

В настоящее время не вызывает сомнений, что бактериологическое исследование с оценкой соотношения количества типичных лактобактерий к остальным компонентам микробной флоры влагалища является основным среди лабораторных диагностических тестов. Но выполнить его не всегда возможно. Большую надежду вселяет разработанная методика количественной оценки вагинальной биоты методом ПЦР в реальном режиме времени с проведением сравнительного анализа конкретных представителей нормо- и условно-патогенной микрофлоры и общего количества микроорганизмов во влагалище. Выявление дисбаланса микрофлоры в этом случае и возможность оценки степени его выраженности позволяют определить дисбиоз на ранних стадиях развития (методика разработана сотрудниками НПФ «ДНК-технология» и носит название «Фемофлор»).

Основные принципы лечения БВ:

1. Противомикробная терапия, направленная на подавление анаэробной флоры, местно или системно.

2. Создание оптимальных физиологичных условий среды влагалища.

3. Восстановление нормального или максимально приближенного к норме микробиоценоза влагалища.

4. Проведение иммунокоррегирующей терапии.

Учитывая локальный характер поражений при БВ, оптимальным считается проведение местных лечебных мероприятий.

Согласно международным рекомендациям CDC, для лечения БВ эффективны следующие схемы: внутрь метронидазол 500 мг 2 раза или клиндамицин 300 мг 3 раза в сутки в течение 7 дней в сочетании с интравагинальным введением клиндамицин-крема 2%-5 г 1 раз ежедневно в течение 3-7 дней, или по той же схеме клиндамицина в свечах 100 мг, или метронидазол-геля 0,75%-5,0 г 2 раза в сутки в течение 5 дней.

Возможно сочетанное применение препаратов трихопола — 1 вагинальная таблетка 500 мг однократно и 250 мг препарата внутрь 2 раза в день. Как правило, в легких случаях (компенсированный или бессимптомный БВ) лечение ограничивается только местными средствами, в остальных — целесообразен комбинированный прием (пероральный и интравагинальный).

При назначении метронидазола следует учитывать:

Альтернативой европейским рекомендациям может быть применение антисептиков — препаратов хлоргексидина (гексикон для местной терапии в свечах или геле) и йода (бетадин, йодоксид).

При сочетании БВ с кандидозом интравагинально следует использовать комбинированные средства — клион Д, неопенотран, тержинан или йодсодержащие препараты в комбинации с флуконазолом. При выделении Atopobium vaginae и рецидивирующем течении общепризнанна необходимость использования препаратов клиндамицина внутрь и местно, Leptotrix (в количестве 10 4 и более КОЕ/мл) чувствителен к амоксициллину, который назначается внутрь в суточной дозе 2,0 в течение 7 дней с целью общей санации слизистой влагалища.

Для восстановления микробиоценоза влагалища на II этапе лечения назначаются препараты-эубиотики — флорадофилус, лактогин внутрь или экофлор местно. Они наиболее адаптированы и эффективны для этих целей.

У женщин в менопаузе на втором этапе лечения используются эстрогены — эстриол местно (овестин фирмы «Органон»).

Несмотря на предложенное разнообразие методов лечения, рецидивы бактериального вагиноза являются главной проблемой этой патологии. Общепринятые методы лечения в этих случаях малоэффективны. К безусловно перспективным следует отнести вакцинацию женщин в виде монотерапии или в сочетании с индукторами интерферона (генферон, виферон, эпиген спрей, лавомакс, циклоферон и другие), используемые после основного курса лечения. Вакцина Солкотриховак может применяться как абсолютно самостоятельный метод для профилактики рецидивов бактериального вагиноза. Она создана на основе 8 штаммов атипичных кокковых форм лактобацилл, которые обычно встречаются при БВ. Вакцина активирует выработку антител к различной микрофлоре влагалища, включая трихомонады, стимулирует синтез иммуноглобулина А и, по нашим данным, достоверно увеличивает продукцию всех классов иммуноглобулинов, повышает макрофагальную и фагоцитарную активность. При выраженных симптомах бактериального вагиноза вакцинация проводится только в сочетании с этиотропной терапией; при компенсированном или субкомпенсированном дисбиозе достаточно монотерапии Солкотриховаком. Вакцина очень эффективна в случаях сочетания бактериального вагиноза и хронического цервицита, чем бы он ни был обусловлен, что, вероятно, связано с усилением продукции секреторного Ig A и, по нашим данным, лизоцима. Вакцина хорошо переносится, редко развивается местная реакция (покраснение, припухлость) и, в единичных случаях, общая (повышение температуры, головная боль, озноб). При развитии такой реакции введение препарата следует прекратить (аллергические реакции при использовании Солкотриховака не описаны). Противопоказанием для вакцинации являются острые инфекционные заболевания, туберкулез, лейкоз, декомпенсированные болезни почек и сердца. Лечебный курс состоит из трех внутримышечных введений препарата с интервалом 2 недели и ревакцинацией однократной инъекцией через 1 и затем каждые 2 года. Эффективность лечения прослеживается уже после второй инъекции в начале терапии, а стойкость лечебного и профилактического эффекта гарантирована после основного базисного курса. Следует подчеркнуть, что вакцинация Солкотриховаком, восстанавливая влагалищную микрофлору, предотвращает рецидивы бактериального вагиноза у 80% больных.

Таким образом, бактериальный вагиноз как основную причину различных инфекционно-воспалительных осложнений в акушерской и гинекологической практике, включая сепсис, можно устранить, используя имеющиеся методы терапии. Вакцинация женщин — один из важнейших методов лечения и профилактики.

Л.И. Мальцева,

доктор медицинских наук, профессор, зав. кафедрой акушерства и гинекологии I

Казанская государственная медицинская академия

Источник

Не более днк lactobacillus spp что значит

Исследование, направленное на выявление генетического материала (ДНК) микроорганизмов Lactobacillus spp., Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени, для диагностики бактериального вагиноза.

Бактериальный вагиноз, ДНК [полимеразная цепная реакция в режиме реального времени], количественный анализ.

Синонимы английские

Bacterial vaginosis, DNA [polymerase chain reaction, real-time PCR], quantitative, qRT-PCR.

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

ГЭ/мл (геномных эквивалентов на миллилитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Общая информация об исследовании

Бактериальный вагиноз является патологическим процессом, возникающим преимущественно у женщин репродуктивного возраста и характеризующимся изменением состава и соотношения микрофлоры влагалища. Он является частой причиной патологических выделений, может быть ассоциирован с развитием воспалительных заболеваний органов малого таза у женщин и усиливает риск заражения инфекциями, передающимися половым путем. Развитие бактериального вагиноза также повышает риск развития патологий беременности: преждевременных родов, самопроизвольных абортов, низкого веса ребенка при рождении, развития послеродового эндометрита, вагинита. Следует отметить, что у 50 % женщин бактериальный вагиноз может иметь бессимптомное течение.

Наиболее часто при бактериальном вагинозе увеличивается количество микроорганизмов: Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae. Gardnerella vaginalis относится к условно-патогенной микрофлоре влагалища, является факультативным анаэробом. Микроорганизмы выявляются у 95-99 % женщин с бактериальным вагинозом, в том числе при его рецидивирующем течении. Чрезмерное размножение гарднерелл приводит к вытеснению преобладающих во влагалище при норме Lactobacillus spp. и стимулирует избыточный рост анаэробных бактерий и микоплазм. Риск развития гарднереллеза увеличивают вагинальные спринцевания, использование внутриматочных контрацептивов и спиралей, хламидийная или гонококковая инфекция и т.д. Бактерия Atopobium vaginae является грамположительной анаэробной палочкой, выявляющейся у 99-100 % пациентов с бактериальным вагинозом. Она играет роль в развитии воспалительных заболеваний органов малого таза у женщин, часто обнаруживается при рецидивирующем бактериальном вагинозе. Обнаружение данных микроорганизмов играет важную роль в своевременной диагностике бактериального вагиноза, в том числе при его бессимптомном течении, предотвращении развития осложнений, а также в назначении правильной патогенетической терапии.

Диагностика бактериального вагиноза основана на сочетании клинических проявлений и данных лабораторного обследования. В лабораторной диагностике является важным определение видового состава микрофлоры влагалища и определение соотношения микроорганизмов. При этом определяется количество бактерий Lactobacillus spp. и других микроорганизмов.

К современным методам диагностики относится метод полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РТ-ПЦР). Это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять генетический материал исследуемого возбудителя. Он характеризуется высокими показателями диагностической чувствительности и специфичности, быстротой получения конечного результата. Особенностью метода является возможность выявлять ДНК (дезоксирибонуклеиновую кислоту) вируса даже при малом содержании её в исследуемом биологическом материале. Метод основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК. При этом производится количественная оценка ДНК Bacteria (общее количество бактерий), Lactobacillus spp., Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae с анализом соотношения концентраций этих микроорганизмов. Метод применяется для диагностики бактериального вагиноза, в том числе при его бессимптомном течении, у женщин с патологиями беременности, с развитием воспалительных осложнений после беременности, а также при назначении и контроле проводимой терапии. При оценке результатов РТ-ПЦР выявляются фрагменты ДНК как живых, так и разрушенных микроорганизмов, поэтому результат исследования будет оставаться положительным еще в течение некоторого времени, даже если лечение было подобрано правильно.

Для чего используется исследование?

Когда назначается исследование?

Что означают результаты?

ДНК Bacteria: более или равно 10^6 ГЭ/мл.

ДНК Lactobacillus: не менее концентрации ДНК Bacteria.

ДНК Gardnerellavaginalis: не превышает концентрацию ДНК Lactobacillus.

ДНК Atopobiumvaginae: не превышает концентрацию ДНК Lactobacillus.

Результаты выдаются с заключением врача.

9 Gardnerella vaginalis, ДНК [реал-тайм ПЦР]

93 Анализ микробиоценоза влагалища. 16 показателей, ДНК количественно [реал-тайм ПЦР]

114 Анализ микробиоценоза влагалища. 8 показателей, ДНК количественно [реал-тайм ПЦР]

23 Посев на Gardnerella vaginalis с определением титра и чувствительности к противомикробным препаратам

49 Исследование микробиоценоза влагалища с определением чувствительности к антибиотикам

Кто назначает исследование?

Гинеколог, акушер-гинеколог, уролог, терапевт, врач общей практики.

Источник