Назовите причины возможных артефактов в микропрепаратах для чего их необходимо различать

АРТЕФАКТ

Артефакт (латинский artefactum искусственно сделанное) — явление, наблюдаемое при исследовании объекта, несвойственное этому объекту и искажающее результаты исследования. АРТЕФАКТЫ могут возникать вследствие воздействия на объект случайных факторов, несоблюдения установленных правил, инструкций, а также в результате организационных, методических и технических погрешностей. В этих случаях Артефакты наблюдаются при гистологических, гистохимических, бактериоскопических, бактериологических исследованиях в результате неправильной фиксации и обезвоживания, а также из-за дефектов приготовления препаратов при получении срезов, заливке, окраске, производстве гистохимических реакций. В гистологических препаратах артефактами могут быть микроорганизмы с инструментов, стекол, из красителей, воздуха и воды. Артефактом может быть уменьшение объема клеток, ядер, появление в препаратах отдельных включений, гемолиз крови, обусловленный промыванием тканей водой в процессе секции. Такие артефакты наблюдаются при исследовании материала, изъятого из трупов, а также при биопсии и приготовлении мазков (см. Микроскопические методы исследования, Гистологические методы исследования).

Артефакты могут возникнуть при авторадиографии (см.), электронной микроскопии (см.), рентгенографии (см.). Так, артефакты на рентгенограммах могут быть обусловлены дефектами пленок, пластинок или усиливающих экранов, а также техническими погрешностями фотообработки. Артифициальные тенеобразования на рентгенограммах могут быть ошибочно расценены как патологические состояния (переломы, воспалительные процессы и др.) или инородные тела. Артефакты подобного происхождения могут быть также в спектрографии, различных видах фотографии, используемой с иллюстративными и исследовательскими целями.

Судебно-медицинской практике встречаются артефакты в виде попадания инородных включений в объекты, предназначенные для микроскопического или иного лабораторного исследования (копоть или частицы с обугленных трупов), металлизации краев ран от секционных инструментов, когда проводится исследование для выявления металла орудия, которым нанесена травма, а также при поступлении ядовитых веществ из консервирующих растворов в объекты, направляемые для судебно-химического анализа, и т. п. Кроме того, существуют артефакты, воспроизводимые с предвзятой целью: искусственно вызываемые или поддерживаемые заболевания или повреждения, а также отдельные симптомы заболеваний (см. Искусственные болезни, Членовредительство).

К артефактам не следует относить отклонения от обычной картины развития биологического или патологического процесса, изменения трупа, хода лабораторных реакций и т. д., а также возникновение изменений, имитирующих различные явления и состояния. Например, артефактом не являются: посмертная микробная инвазия внутренних органов трупа, имитирующая прижизненную бактериемию патогенными микробами; участок посмертного высыхания кожи, симулирующий прижизненную ссадину; быстро наступающий посмертный аутолиз ткани поджелудочной железы, имитирующий прижизненный некроз; формалиновый пигмент в ретикулоэндотелии печени или селезенки, отложившийся в процессе фиксации тканей, похожий на малярийный пигмент, и т. д.

Подозрение на артефакт возникает при несоответствии одного какого-то факта другим данным, полученным в процессе исследований или наблюдений. Поэтому для установления истинного диагноза (в зависимости от происхождения артефакта) должны применяться соответствующие клинико-лабораторные или контрольные (проверочные) исследования, направленные на его исключение.

Библиография: Бойд Дж. А. Авторадиография в биологии и медицине, пер. с англ., М., 1957, библиогр.; Войно-Ясенецкий М.В. и Шаботинский Ю.М. Источники ошибок при морфологических исследованиях, Д., 1970, библиогр.; Гольдин Л. С. Основы гистологической техники электронной микроскопии, М., 1963, библиогр.; Заварзин А. А. и Румянцев А. В. Курс гистологии, с. 48, М., 1946; Меркулов Г. А. Курс патологогистологической техники, Д., 1969, библиогр.; Роскин Г. И. и Левинсон Л. Б. Микроскопическая техника, М., 1957, библиогр.; Уемов А. И. Логические ошибки, М., 1958.

Источник

Артефакты приготовления гистологического препарата и пути их устранения. 8445

Артефактом (от латинского art – искусство и factum – сделанный) называют то, что создано искусственно. В гистологии артефактом называют признаки или структуры, возникающие на препаратах случайно или вследствие плохой обработки. Искажения истинного вида ткани могут возникнуть на любом этапе изготовления препарата.

К наиболее часто встречаемым артефактам фиксации относят:

· Посмертную дегенерацию – возникает при несвоевременной фиксации или при взятии очень крупных кусочков материала

· Сморщивание – возникает при слишком длительной фиксации

· Выпадение осадка (темно-коричневый пигмент в виде зернышек или глыбок)– при использовании кислого формалина, плохом удалении фиксаторов

Для устранения зерен пигмента (осадка) на препарате срезы помещают:

· в 1-5% раствор аммиака на 15-20 мин

· в 70% спирт на 15-20 мин

· в 1% раствор гидроксида калия в 80% спирте (1:25) на 10 мин

После чего срезы промывают водой и окрашивают

Чрезмерное уплотнение можно попытаться исправить, поместив кусочки ткани в 10% раствор лимонной кислоты на 1-2 часа.

Проявления посмертной дегенерации устранить нельзя.

Артефакты приготовления гистологических срезов и пути их устранения.

Артефакты окрашивания и заключения препаратов:

Источник

Правила работы с увеличительными приборами

ПРАВИЛА РАБОТЫ С МИКРОСКОПОМ

В чем заключается ВАЖНОСТЬ соблюдения поэтапного выполнения действий при работе с временными и постоянными микропрепаратами

Работа № 3

Волокна ваты и пузырьки воздуха – возможные артефакты при изучении объектов на временных препаратах.

Приготовление временного препарата: в каплю воды на предметном стекле поместить несколько волокон ваты, покрыть покровным стеклом, поместить на предметный столик, изучить при малом и большом увеличениях.

Большое увеличение ___×___

Перечислите возможные причинывозникновения артефактов при изготовлении препаратов. Объясните, почему вам, как будущим врачам, необходимо при микроскопии микропрепаратов различать артефакты.

Работа № 4

Перекрест волос

Работа с постоянным микропрепаратом, для закрепления навыков работы с микроскопом при разных увеличениях и усвоение правил обращения с микропрепаратами.

Работа № 5

Клетки покровной ткани

Постоянные препараты «Кожица лука» и «Эпителий слизистой полости рта человека» – изучите и зарисуйте при большом увеличении.

Препарат «Кожица лука»

Препарат «Эпителий слизистой полости рта человека»

При анализе постоянных препаратов покровной ткани у растений и животных, укажите черты сходстваиотличия клеток ткани, выполняющей сходную функцию у представителей разных Царств.

Работа № 6

Клетки крови

Постоянные препараты «Клетки крови лягушки» и «Клетки крови человека». Изучите и зарисуйте форменные элементы крови – эритроциты у лягушки и человека при большом увеличении.

Работа № 7

Разнообразие клеток

Прокариотические – клетки бактерий. Эукариотические клетки – растительная и животная клетки.

Препарат «Бактериальная клетка. Колонии бактериальных клеток»

Большое увеличение ___×___

СТРОЕНИЕ ПРОКАРИОТИЧЕСКОЙ КЛЕТКИ (схема)

КЛЕТОЧНАЯ ТЕОРИЯ (1838 – 1839 гг) – основные положения

СТРОЕНИЕ РАСТИТЕЛЬНОЙ КЛЕТКИ (схема)

СТРОЕНИЕ ЖИВОТНОЙ КЛЕТКИ (схема)

В чем состоит гомологичность растительной и животной клеток эукариот?

ЦИТОЛОГИЧЕСКИЕ ПРИЗНАКИ, ХАРАКТЕРНЫЕ ДЛЯ ПРО- И ЭУКАРИОТ

В чем принципиальные отличия клеток про- и эукариот : а – по строению; б – при их микроскопии?

Источник

Назовите причины возможных артефактов в микропрепаратах для чего их необходимо различать

Изучение форменных элементов крови

Артефактами (лат. artefactum — искусственно сделанное) в гистологии обычно называют изменения морфологической картины тканей, возникшие по вине исследователя. Артефакты являются результатом нарушения методики приготовления препаратов. Учебные препараты крови тоже могут содержать артефакты. В некоторых препаратах доля разрушенных при приготовлении препарата лейкоцитов доходит до 10%. Необычные структуры привлекают внимание студентов, вызывают вопросы. Данный раздел также адресован студентам, намеренным непременно разобраться во всех необычных явлениях, наблюдаемых в микроскоп.

С одной стороны, артефактам можно было бы не уделять внимания, поскольку хороший препарат не должен их содержать. С другой стороны, артефакты встречаются достаточно часто. Кроме того, в ветеринарной практике исследователю не всегда удаётся работать с качественными препаратами, не всегда имеется возможность провести повторное исследование.

Если приходится выполнять подсчёт лейкоцитарной формулы в подобных условиях, то лучше выбрать наиболее сохранный участок препарата. Можно игнорировать повреждённые клетки, не включая их в подсчёт. Однако может оказаться, что повреждены клетки только одного вида, например, моноциты. Известно, что патологические изменения могут касаться преимущественно одного вида лейкоцитов. Патологически изменённые клетки оказываются менее стойкими к повреждающим факторам, возникающим в ходе приготовления препарата. При подобном способе подсчёта результаты могут быть грубо искажены. Рис. 33 иллюстрирует данную ситуацию, когда в учебном препарате отсутствовали моноциты, но имелись следы разрушенных ядер лейкоцитов.

Среди артефактов часто встречается отложение избыточного количества красителя (рис. 34).

Рис. 33. Артефакт. Справа – три
сохранных лейкоцита. Слева – голубое, размытое пятно, вероятно, остаток ядра разрушенного моноцита

Рис. 34. Артефакт. Отложение избыточного количества красителя
на инородной частице, попавшей
в мазок крови

Распространённым артефактом является лизис клеток (греч. lysis – растворение). После разрушения плазматической мембраны и растворения цитоплазмы в окружающей клетку жидкости ядро какое-то время сохраняет целостность, при этом набухает, изменяет форму, становится более светлым. Факт разрушения цитоплазмы не всегда заметен в учебный микроскоп. В результате набухшие ядра лимфоцитов могут быть приняты за ядра моноцитов либо за базофильные гранулоциты и др. (рис. 35-38).

Рис. 35. Артефакт. Лизис сегментоядерного нейтрофильного гранулоцита. От клетки остались четыре сильно набухших сегмента ядра

Рис. 36. Артефакты. Лизис эритроцитов и лейкоцита. Следы ядра лейкоцита видны в виде синего пятна

Рис. 37. Артефакт. От лизированного лимфоцита осталось ядро, ставшее зернистым, похожим на базофильный гранулоцит

Рис. 38. Артефакт. Разрушенный эозинофил. Видны остатки ядра и свободно расположенные вокруг ацидофильные гранулы

Однако не всегда названные изменения клеток являются результатом нарушения правил приготовления препаратов. В патологически изменённых тканях часто приходится наблюдать подобные явления (рис. 39).

Рис. 39. Печень перепела. Лизированные гранулоциты в очаге воспаления. Вокруг некоторых разрушенных лейкоцитов находятся свободно расположенные ацидофильные гранулы

© Новосибирский государственный аграрный университет, 2011

© ГНУ Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока СО Россельхозакадемии, 2011

Подписпна в печать 10.04.2011, Издат. №171 (УДК 619:611.018 (075); ББК 48.32, я 73; К 143)

Источник

Основные источники ошибок при морфологических исследованиях

Основные источники ошибок при морфологических исследованиях / Фирстова О.И., Бадяева Е.Е. // Избранные вопросы судебно-медицинской экспертизы. — Хабаровск, 2008. — №9. — С. 117-120.

библиографическое описание:
Основные источники ошибок при морфологических исследованиях / Фирстова О.И., Бадяева Е.Е. // Избранные вопросы судебно-медицинской экспертизы. — Хабаровск, 2008. — №9. — С. 117-120.

код для вставки на форум:

Основным объектом микроскопических исследований служит срез, т.е.: препарат, способный показать лишь статичное состояние заведомо умерщвленных тканей и клеток. Но стоит заметить, что и витальная микроскопия не лишена помех. Приемы, открывающие доступ к внутренним органам, или травма, наносимая любыми оптическими устройствами, вводимыми в ткань, нередко вызывают не только повреждения, но и нежелательные реактивные явления.

Живые ткани — кусочки, взятые путем биопсии или вырезанные у только что убитого животного, — наиболее пригодны и для изготовления гистологических препаратов. Но при этом возникают артефакты, появляющиеся в живых тканях в момент разреза или фиксации. Кроме того, в связи с наступлением смерти всего организма происходят изменения, поскольку терминальные расстройства функций (происходящие даже при быстрой гибели) получают свое морфологическое отображение, не всегда учитываемое должным образом.

Наряду с агональными и посмертными изменениями, серьезные помехи создают технические процедуры, которым подвергается материал, подготавливаемый для гистологических исследований. Фиксация, обезвоживание и т.д. всегда в той или иной степени искажают естественное строение живых клеток и тканей.

Уже на самом первом этапе работы морфолога — во время получения материала для микроскопического исследования возникают разнообразные артефакты. Так, например, очень легко возникает ложный ателектаз легкого, сопровождающийся мнимым утолщением межальвеолярных перегородок, на местах, подвергшихся сдавливанию во время осмотра органа и иссечения из него кусочков для исследований. Поверхность разреза ткани, если он сделан недостаточно острым или тупым ножом, делает его практически непригодным для гистологических исследований (так как при этом возникают ложные сдавления ткани, ее разволокнения и т.д., имитирующие травматическое повреждение тканей). В некоторых случаях наблюдаются особые артефакты, обусловленные разносом по поверхности раны обрывков тканей и клеток (чаще это отмечается в кусочках, содержащих кость и полученных путем выпиливания, где опилки могут оказаться в самых разнообразных местах). При вырезании кусочков из органов, имеющих трубчатое строение, частицы поврежденной ткани могут вдавливаться в просвет трубок. Проявляя бережность, пользуясь острыми инструментами и применяя некоторые специальные приемы, удается уменьшить вред, наносимый тканям, подлежащим исследованию.

Артефакты при фиксации. Фиксация играет решающую роль для сохранения структуры тканей, предупреждения развития в них посмертных изменений, а также успешной последующей окраски. Полноценность фиксации зависит от правильного выбора фиксатора в зависимости от цели исследования, от сроков прошедших с момента смерти, от величины фиксированных кусочков, количества фиксирующей жидкости, продолжительности пребывания в ней материала и т.п. Погрешности при фиксации материала служат причиной многочисленных артефактов. Формалин представляет наиболее распространенный фиксатор, и его преимуществом является простота использования, недорогая цена, хорошие диффузионные свойства и достаточное уплотнение тканей. При длительном хранении в нем изменяется pH в кислую сторону вследствие образования муравьиной кислоты, которая мешает хорошей фиксации. Нейтрализация кислой реакции легко достигается прибавлением углекислого кальция. При фиксации формалином, особенно кислым, возможно появление в срезах темно-коричневого пигмента в виде зернышек или глыбок (результат реакции формалина с гемоглобином ткани). Так называемый «формалиновый» пигмент имитирует другие кровяные пигменты (например, глыбки гемосидерина, которые образуются при распаде эритроцитов при травматических кровоизлияниях и повреждениях тканей), что при недостатке опыта морфолога может привести к диагностическим ошибкам, особенно в случаях при определении давности происхождения повреждений.

Артефакты в результате проводки и заливки материала. На оценку морфологических картин существенно влияет ряд факторов при обработке и заливке материала, а также при его резке. Правильный выбор среды для заключения тканей играет важную роль для получения полноценного материала и последующего приготовления срезов и окраски. Как известно, наиболее широко используются для этой цели целлоидин и парафин. Уже при подготовке материала к заключению в целлоидин или парафин ткань при фиксации или набухает (в формалине) либо сморщивается (в алкоголе), а последующая обработка усиливает сморщивание вследствие дегидратации. Все эти процедуры, естественно, изменяют тканевые структуры. Заключение тканей в парафин очень ценно для приготовления тонких серийных срезов в 1-5 мк. Основным его недостатком является нагревание залитого в парафин материала, вследствие чего, например, цитоплазма нервных клеток сморщивается на 8-12 % и интенсивно окрашивается, иногда в ней образуются перицеллюлярные полости. При неполном обезвоживании мозговой ткани парафин не пропитывает ее целиком, она высыхает, и клетки оказываются особенно сильно сморщенными. Подобные изменения в тканях при ошибочной трактовке могут приниматься за явления несуществующего отека либо патологического изменения клеток.

Артефакты и ошибки, связанные с приготовлением срезов. В результате дефектов при приготовлении срезов могут наблюдаться морфологические картины, которые ведут к ошибочным заключениям. Прежде всего, следует подчеркнуть необходимость исследования клеток на срезах не толще 4-7 мк. При наличии более толстых срезов часто получается ложное представление об увеличении количества клеток (глии в ЦНС и т.д.). Толстые срезы также мешают правильной оценке внутренней структуры клеток. Значительная и неравномерная толщина среза обычно зависит от плохой заточки микротомной бритвы, при наличии на ней мелких зазубрин получаются рваные срезы, которые в дальнейшем очень трудно окрашивать и оценивать. Также имеет большое значение направление срезов, так на срезах проведенных тангенциально, создается ложное представление о многослойном расположении клеток, об их пролиферации или об образовании ложных структур, так в мозговой ткани может получиться ложное представление в виде участков выпадения нервных клеток.

Полностью избежать повреждений и артефактов, пожалуй, нельзя. Остается, следовательно, помнить об их возможности, критически оценивая результаты данных изменений и учитывать их при диагностике патологических процессов в органах и тканях.

похожие статьи

Редкая ошибка / Вонгродзский В.А. // Судебно-медицинская экспертиза. — М.: Изд-во Наркомздрава, 1928. — №8. — С. 116-119.

Атлас по судебно-медицинской гистологии / Пиголкин Ю.И., Кислов М.А., Должанский О.В., Филиппенкова Е.И., Крупин К.Н. — 2021.

Анализ недостатков судебно-гистологических исследований и пути их устранения / Гедыгушева Н.П., Буланова Э.В. // Матер. IV Всеросс. съезда судебных медиков: тезисы докладов. — Владимир, 1996. — №2. — С. 47-49.

Источник